Resumen

Introducción: 

La mastitis bovina es una enfermedad infecciosa prevalente en los rebaños lecheros de todo el mundo, que provoca pérdidas económicas considerables. Citrobacter freundii ha surgido como un patógeno oportunista asociado a la mastitis, y su creciente resistencia a los antibióticos plantea desafíos terapéuticos significativos.

Métodos: 

En este estudio, se aisló un nuevo fago lítico, Citro-6, de muestras de aguas residuales y heces de granjas lecheras utilizando C. freundii Z6 como bacteria huésped. El fago se caracterizó mediante análisis morfológicos y genómicos. Su rango de hospedadores, estabilidad bajo condiciones variables de temperatura y pH, y efectos sobre la adhesión bacteriana, invasión, citotoxicidad y expresión de citocinas proinflamatorias en células epiteliales mamarias bovinas fueron evaluados in vitro.

Resultados: 

Los análisis morfológicos y genómicos identificaron a Citro-6 como miembro de la clase Caudoviricetes. Codifica una secuencia completa de endolisina con un dominio catalítico intacto y carece de genes de virulencia o resistencia a antibióticos. Citro-6 mostró una amplia actividad lítica, lisando el 83,3% de las cepas de Citrobacter testadas, y se mantuvo estable a temperaturas de hasta 45 °C y en un rango de pH de 5,0 a 9,0. En ensayos celulares, el tratamiento con Citro-6 redujo significativamente la adhesión e invasión bacteriana en aproximadamente 1,66 y 1,19 logaritarimos, respectivamente. Además, atenuó eficazmente la citotoxicidad inducida por patógenos, reduciendo la muerte celular en aproximadamente un 75,2% a las 8 horas de la infección en comparación con el grupo infectado por Z6. Citro-6 también evitó daños celulares morfológicos y suprimió la sobreexpresión de citocinas proinflamatorias, lo que resultó en disminuciones en las concentraciones de IL-1β y TNF-α de aproximadamente el 37,1% y 47,6%, respectivamente, en comparación con el control infectado.