El virus de la fiebre aftosa, miembro de la familia de los picornavirus, representa una amenaza significativa para la ganadería mundial. Si bien se sabe que la macropinocitosis desempeña un papel crucial en la entrada del virus de la fiebre aftosa en las células, aún no se comprenden completamente las proteínas celulares específicas que regulan este proceso y las vías de señalización posteriores asociadas con estas proteínas. En este estudio, demostramos que el grupo de proteínas de membrana de diferenciación 44 (CD44) es esencial para la internalización del FMDV en las células BHK-21, mientras que no está involucrado en la unión del virus a la célula. Además, encontramos que el CD44 se internaliza en respuesta a la entrada del virus de la fiebre aftosa. Curiosamente, el uso de un inhibidor de la macropinocitosis perjudicó tanto la internalización de CD44 como la entrada e infección por el virus de la fiebre aftosa, lo que indica una fuerte conexión entre estos dos procesos. Experimentos posteriores revelaron que el CD44 facilita la internalización del virus de la fiebre aftosa a través de la macropinocitosis. Es importante destacar que nuestro estudio muestra que CD44 interactúa con las proteínas de la cápside VPFM VP2 y VP3 y se fosforila durante la entrada del virus. La fosforilación de CD44 promueve posteriormente la fosforilación de la quinasa 1 activada por p21 (PAK1), que es un componente crítico en la entrada macropinocitótica del virus de la fiebre aftosa. En general, este estudio proporciona nuevos conocimientos sobre el papel de CD44 en la invasión de patógenos en las células huésped y destaca las posibles estrategias para mejorar las vacunas contra la fiebre aftosa.