Cuantificación automatizada basada en píxeles del genoma del circovirus porcino 2 en tejidos incrustados en parafina fijados en formalina mediante hibridación in situ

Cuantificación automatizada basada en píxeles del genoma del circovirus porcino 2 en tejidos incrustados en parafina fijados en formalina mediante hibridación in situCuantificación automatizada basada en píxeles del genoma del circovirus porcino 2 en tejidos incrustados en parafina fijados en formalina mediante hibridación in situ

Mnica Sagrera,,&#x;Mònica Sagrera1,2,3lex Cobos,,,&#x;Àlex Cobos1,2,4,5Laura Garza-MorenoLaura Garza-Moreno3Mnica Prez,,Mónica Pérez1,2,4Gema García-Buendía,,Gema García-Buendía1,2,4Eva Huerta,,Eva Huerta1,2,4Anna Maria Llorens,,Anna Maria Llorens1,2,4David EspigaresDavid Espigares3Marina Sibila,,&#x;Marina Sibila1,2,4Joaquim Segals,,
&#x;Joaquim Segalés2,4,5*
  • 1IRTA, Salud Animal, Centro de Investigación en Sanidad Animal (CReSA), Campus de la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB), Bellaterra, España
  • número arábigoUnitat mixta d’investigació IRTA-UAB en Sanitat Animal, Centre de Recerca en Sanitat Animal (CReSA), Campus de la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB), Bellaterra, España
  • 3Ceva Salud Animal, Avenida Diagonal, Barcelona, España
  • 4Centro Colaborador WOAH para la Investigación y Control de Enfermedades Porcinas Emergentes y Emergentes (IRTA-CReSA), Barcelona, España
  • 5Departamento de Sanidad y Anatomía Animales, Facultat de Veterinària, UAB, Barcelona, España

Introducción: La detección del circovirus porcino 2 (PCV2) en tejidos linfoides es esencial para fines diagnósticos e investigadores. La hibridación in situ (ISH) permite la localización de genomas virales en secciones de tejido, pero tradicionalmente se evalúa visualmente, lo que puede introducir subjetividad.

Métodos: Este estudio desarrolló un clasificador automatizado de píxeles para cuantificar el genoma de PCV2 utilizando la tecnología RNAscope® ISH. Se analizaron cuatro tejidos linfoides (amígdalas y ganglios linfáticos traqueobronquiales, mesentéricos y superficiales) de 66 cerdos inoculados experimentalmente. El etiquetado de PCV2 se evaluó tanto visualmente (puntuaciones 0–3) como digitalmente (porcentaje del área etiquetada).

Resultados: Se observó una fuerte correlación entre la puntuación visual y digital ISH (ρ = 0,96), lo que permite definir umbrales digitales correspondientes a las puntuaciones visuales. Entre todos los tejidos, TBLN mostró el marcado más alto de PCV2. Este tejido fue evaluado posteriormente mediante la reacción en cadena cuantitativa de la polimerasa PCV2 (qPCR), mostrando una alta correlación con los resultados digitales de ISH (ρ = 0,85).

Discusión: Estos hallazgos demuestran la fiabilidad de las herramientas digitales de patología para la cuantificación objetiva del PCV2 en tejidos linfoides. La puntuación automatizada mejora la consistencia, reduce el sesgo del observador y mejora la eficiencia diagnóstica en la investigación y vigilancia del PCV2.

 

 

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