Chengcheng Wu¹Lihan Tao²Haiqin Li¹Cong Huang¹Yanbing Zeng^1*

• ¹Instituto de Ganadería y Medicina Veterinaria, Academia de Ciencias Agrícolas de Jiangxi, Nanchang, China
• ^{número arábigo}Facultad de Ciencia y Tecnología Animal, Universidad Agrícola de Jiangxi, Nanchang, China

La replicación del genoma es un paso clave en el ciclo de vida del coronavirus y requiere la participación de una variedad de proteínas no estructurales codificadas viralmente. La proteína no estructural 13 (Nsp13) de los coronavirus es una helicasa altamente conservada y se considera un objetivo farmacológico ideal. Sin embargo, las características de actividad de la helicasa Nsp13 del virus de la bronquitis infecciosa (IBV) siguen sin estar claras. En este estudio, expresamos y caracterizamos bioquímicamente el IBV Nsp13 recombinante purificado y descubrimos que IBV Nsp13 era capaz de desenrollar sustratos dúplex en una dirección de 5′ a 3′ utilizando la energía de la hidrólisis de todos los nucleótidos trifosfato (NTP) y trifosfato de desoxirribonucleósidos (dNTP). También exploramos la selectividad del sustrato y los factores que influyen en la actividad de desenrollado de IBV Nsp13. La continuidad del ácido nucleico de la hebra de carga fue esencial para que Nsp13 desenrollara los sustratos dúplex. Además, demostramos por primera vez que la helicasa Nsp13 del IBV también tenía una actividad de recocido para promover dos ácidos nucleicos monocatenarios para formar un ácido nucleico bicatenario. El análisis bioquímico de las actividades de desenrollado y recocido del IBV Nsp13 fue útil para revelar en profundidad el mecanismo de replicación del coronavirus y el desarrollo de fármacos antivirales.