Chunlu Chen¹Jia Lu²Yuhan Qu¹Jianhua Dong¹Yihao Hong¹Yongping Ren¹Shouqing Jiang¹Rafael Baptista³Dong Wang⁴Luis Aj Mur⁵Lihua Lyu^1*

• ¹Facultad de Ciencias Animales, Universidad Agrícola de Shanxi, Jinzhong, China
• ^{número arábigo}Facultad de Software, Universidad Agrícola de Shanxi, Jinzhong, China
• ³Instituto de Ciencias Biológicas, Ambientales y Rurales, Campus de Penglais, Universidad de Aberystwyth, Aberystwyth, Gales, Reino Unido
• ⁴Instituto de Ciencia Animal, Academia China de Ciencias Agrícolas, Beijing, China
• ⁵Departamento de Biología y Salud, Universidad de Aberystwyth, Aberystwyth, Reino Unido

Introducción: La 2-metoxi-1,4-naftoquinona (MNQ), un compuesto derivado de Impatiens balsamina L., es reconocida por sus propiedades antiinflamatorias y antioxidantes. Sin embargo, los efectos de D19, un derivado de MNQ, permanecen inexplorados. Este estudio tuvo como objetivo dilucidar el efecto protector de D19 contra la disfunción de las células de la granulosa folicular (GC) inducida por lipopolisacáridos (LPS) en ovejas y sus mecanismos moleculares subyacentes.

Métodos: Se estableció un modelo in vitro de lesión de GC utilizando LPS para inducir inflamación y estrés oxidativo. Los efectos de D19 se evaluaron examinando la respuesta inflamatoria, el estrés oxidativo, la ferroptosis y la esteroidogénesis después del tratamiento. Se aplicó interferencia génica para derribar la expresión de GPX4 para validar su papel en el mecanismo de protección de D19.

Resultados: D19 atenuó la ferroptosis inducida por LPS en GC al restaurar la expresión del regulador clave de ferroptosis GPX4. Posteriormente, la interferencia con GPX4 activó NF-κB y reguló al alza la expresión de factores inflamatorios (TNF-α, IL-1β, IL-6) mientras interrumpía NRF2 e inhibía la expresión de factores relacionados con antioxidantes (CAT, GSH-PX, SOD2). D19 protegió eficazmente los GC de la inflamación y el daño oxidativo inducidos por la deficiencia de GPX4. Además, D19 mitigó la ferroptosis causada por la deficiencia de GPX4 y mantuvo la homeostasis metabólica del hierro al restaurar la morfología de los GC, aumentar el potencial de membrana mitocondrial, disminuir la acumulación de Fe²⁺ y peróxidos lipídicos y promover la expresión de GPX4 y FTH1. D19 también mejoró las anomalías de la secreción de hormonas esteroides causadas por la deficiencia de GPX4.

Discusión: Estos resultados demuestran que D19 protege a los GC foliculares de ovejas del daño inducido por LPS al modular la vía de señalización de ferroptosis mediada por GPX4, proporcionando nuevos fármacos potenciales y objetivos terapéuticos para abordar la disfunción de los GC y las anomalías del desarrollo folicular.