El dolor agudo posterior a la orquiectomía no reduce el interés de los carneros alfa en los recursos alimenticios
El dolor agudo posterior a la orquiectomía no reduce el interés de los carneros alfa en los recursos alimenticios
Kauany Zorzenon Uzae1 Pedro Henrique Esteves Trindade1,2 Paula Zanin Rattes1 Anna Laura de Sousa Campos1 Leornado García Bornal1 Marina Belucci Teixeira1 
Henry David Mogollón García1 Antônio Guilherme Pupulim1 Renan Denadai1 Eduardo dos Santos Rossi1 
John Patrick Kastelic3 
João Carlos Pinheiro Ferreira1*- 1Departamento de Cirugía Veterinaria y Reproducción Animal, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia (FMVZ), Universidad Estadual Paulista (Unesp), Botucatu, Brasil
- 2Departamento de Salud de la Población y Patobiología, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Estatal de Carolina del Norte (NCSU), Raleigh, Carolina del Norte, Estados Unidos
- 3Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de Calgary, Calgary, AB, Canadá
El dolor de las ovejas es un problema de bienestar animal que se controla en función de las respuestas conductuales, incluido el apetito. Los machos dominantes (alfa) tienen prioridad para acceder a recursos alimenticios limitados, sin embargo, se desconocen los efectos del dolor en el interés por el alimento en los miembros de un grupo con jerarquía social definida. Nuestro objetivo fue investigar los efectos del dolor agudo posterior a la orquiectomía en el interés de los carneros alfa en acceder a un recurso alimenticio limitado. Dieciocho carneros fueron alojados al azar en corrales de 3 carneros. Después de la aclimatación, se realizó la primera batería de 5 días (consecutiva) de una prueba de comportamiento. En esta prueba, se colocaron 180 g del concentrado de dieta regular en un comedero portátil en el centro del corral; Este alimento era complementario a la dieta y representaba un recurso alimenticio limitado, aunque muy preferible. Los carneros fueron filmados durante 5 minutos después de la introducción de la alimentación. Los niveles jerárquicos (alfa, beta y gamma) se definieron en función del índice jerárquico social de acuerdo con los comportamientos agonísticos de mayor iniciador y menor receptor de los análisis de redes sociales. Después de 15 días, se repitió una segunda batería de pruebas de comportamiento de 5 días. Al día siguiente, los carneros alfa fueron castrados. La flunixina meglumina se administró inmediatamente antes de la cirugía y se realizó una prueba conductual final 8 h después de la orquiectomía, concurrente con un pico esperado de dolor postoperatorio. Para todos los registros, se registró la latencia, frecuencia y tiempo que cada carnero tuvo su boca dentro del comedero y se aplicó la escala de dolor agudo ovino de la Unesp-Botucatu (USAPS). El índice jerárquico social fue más alto en los carneros alfa, seguidos de los beta y gamma. Las puntuaciones de dolor fueron estadísticamente equivalentes a lo largo de los 11 días de evaluación para los carneros beta y gamma, mientras que hubo un aumento en la evaluación final para alfa. No hubo diferencias en la latencia, la frecuencia y la duración entre los RAM alfa, beta y gamma en todas las evaluaciones. Concluimos que el dolor agudo posterior a la orquiectomía no disminuyó el interés de los carneros alfa en acceder a un alimento limitado. La alimentación rutinaria ofrece una valiosa oportunidad para detectar comportamientos relacionados con el dolor utilizando el USAPS en carneros. Sin embargo, la dominancia puede confundir los comportamientos relacionados con el apetito en la evaluación del dolor agudo, ya que el interés de los carneros alfa en la alimentación limitada no se vio afectado por el dolor.
1 Introducción
El bienestar de los animales no humanos se ha convertido cada vez más en una preocupación mundial (1), siendo bien sabido que el dolor reduce el bienestar animal y representa un problema importante (2-4). Las ovejas se crían para abastecer la demanda de carne y lana, y comúnmente se someten a procedimientos dolorosos, como la castración, el corte de cola y el mulesing (2, 5-7), además de ser ampliamente utilizadas en experimentos que involucran dolor (2). Además, las ovejas pueden sufrir dolor debido a situaciones no intencionales, como distocia, enfermedades y lesiones ocasionadas por un mal manejo o alojamiento (8-10). En este contexto, es fundamental un adecuado diagnóstico y tratamiento del dolor (2, 7).
La Asociación Internacional para el Estudio del Dolor entiende el dolor humano como «una experiencia sensorial y emocional desagradable asociada con, o similar a la asociada con el daño tisular real o potencial» (11). Por lo tanto, es evidente que el dolor es un fenómeno multidimensional que involucra componentes sensibles, cognitivos y emocionales que pueden desencadenar sentimientos de sufrimiento animal (12).
Aunque los fenómenos subjetivos son difíciles de evaluar debido a sus características multidimensionales (7), las sensaciones dolorosas en los animales pueden evaluarse por el comportamiento de todo el cuerpo, la expresión facial y los cambios en los parámetros fisiológicos (2, 7, 13). La sensación desagradable causada por el dolor da lugar a respuestas conductuales, como letargo, renuencia a moverse y falta de interés en la alimentación (2). En particular, el apetito es un comportamiento fácilmente visualizable en la producción ovina, ya que el alimento se ofrece diariamente a una hora específica, y la disminución del apetito es un parámetro conductual para evaluar los efectos del dolor en las ovejas (14-16).
Recientemente, se validó una escala conductual específica de la especie para la evaluación del dolor en ovejas (escala de dolor agudo en ovejas de la Unesp-Botucatu; USAPS) utilizando el apetito después de la laparoscopia como uno de los parámetros del dolor (17). Aunque el consumo voluntario de piensos ad libitum por parte de los rumiantes puede estar regulado por factores endógenos (por ejemplo, el dolor), este control también se ejerce por otros mecanismos relacionados con las características de la dieta y el entorno en el que se ofrece (18). Por ejemplo, la jerarquía social también puede influir en la cantidad de alimento ingerido, siendo los machos dominantes (alfa) los que tienen prioridad para acceder a los recursos disponibles (19). Por lo tanto, la dominancia puede ser un factor de confusión en la evaluación del dolor. Sin embargo, hasta la fecha, parece que ningún estudio ha evaluado el interés en la alimentación de carneros alfa que experimentan dolor postoperatorio agudo. Esta cuestión aún no ha sido investigada ni siquiera para los carneros alfa, que representan la posición jerárquica más fácilmente observada y distinguida de otras posiciones. Desde un punto de vista práctico, si la dominancia no parece representar un factor de confusión en la evaluación del dolor, el momento de la alimentación podría ser una oportunidad para detectar cambios en el apetito relacionados con el dolor agudo y mejorar el diagnóstico del dolor en las granjas.
Planteamos la hipótesis de que los carneros alfa, cuando experimentan dolor postoperatorio agudo, presentan un menor interés en el recurso alimenticio. Por lo tanto, nuestro objetivo fue investigar la influencia del dolor agudo post-orquiectomía en el interés de los carneros alfa alojados en tríos para acceder a recursos alimenticios limitados.
2 Materiales y métodos
El estudio fue aprobado por el Comité de Ética sobre el Uso de Animales de la institución anfitriona (protocolo: 0131/2021) y siguió las directrices de Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments (ARRIVE) (20). Los carneros y procedimientos que se presentan a continuación no fueron exclusivos del presente estudio, ya que se originaron a partir de un estudio central de reproducción animal. De esta manera, utilizamos los mismos carneros y procedimientos, y solo incluimos pruebas de comportamiento adicionales para cumplir con nuestro objetivo. El uso del mismo grupo de animales para diferentes estudios contribuye a las cuatro R de la experimentación animal (reducir, reemplazar, refinar y respetar) (Banks, 1995; Russell y Burch, 1959) y promueve el bienestar animal.
2.1 Carneros y alojamiento
Se utilizaron dieciocho carneros mestizos Santa Inés-Dorper clínicamente sanos (Ovis aries), libres de parásitos gastrointestinales, de la misma granja comercial y parvada, de 22,6 ± 2,6 meses de edad y 36,7 ± 5,1 kg de peso corporal. Los carneros fueron alojados aleatoriamente en grupos de 3, en 6 corrales (cada uno de 2 × 2 m), con un piso de listones de madera, acceso ad libitum al agua, y alimentados con una ración mixta total (60% de concentrado y 40% de heno de hierba Tifton 85) ofrecida dos veces al día, consistentemente a ~08:00 y 17:00. La dieta fue formulada para satisfacer los requerimientos nutricionales para el mantenimiento y crecimiento del carnero.
2.2 Pruebas de comportamiento
El cronograma del estudio se resume en un diagrama de flujo (Figura 1). Después de 2 semanas de aclimatación a las instalaciones, los carneros se sometieron a dos baterías preoperatorias de una prueba de comportamiento (1c–5ésimo y 6ésimo–10ésimo evaluaciones), intercaladas por 15 d. Cada batería consistió en 5 días consecutivos de una prueba de 5 minutos al día. La prueba de comportamiento se realizó a la misma hora (16:30) todos los días. Para la prueba, se proporcionaron 180 g del concentrado incluido como parte de la dieta regular en un comedero extra portátil (37,6 × 29,1 × 25,7 cm) colocado en el centro del corral (Figura 2). Esta prueba conductual fue adaptada de estudios previos (21, 22). La prueba de comportamiento fue filmada (Cyber-shot DSC-HX300, SONY Corporation, Brasil) durante 5 min, a partir de la colocación del comedero en el suelo. Estos procedimientos nos permitieron establecer el orden jerárquico social de cada trío, con alfa como el más dominante, beta como intermedio y gamma como el menos dominante.
Figura 1. Diagrama de flujo del estudio.
Figura 2. Ilustración de la prueba de comportamiento en la que se proporciona una porción de concentrado en un comedero portátil adicional colocado en el centro del corral con tres carneros.
La prueba conductual final (11ésimo se realizó 8 h después de la orquiectomía de los RAM alfa (16:30), en el pico esperado de dolor postoperatorio agudo, en función de la vida media de flunixina meglumina (23). Inmediatamente después de la prueba de comportamiento, se administró una segunda dosis de flunixina meglumina para evitar que los animales sufrieran dolor.
Una vez finalizado el período experimental, todos los carneros se incorporaron al rebaño de la facultad.
2.3 Procedimientos quirúrgicos
A la mañana siguiente de la finalización de la segunda batería de pruebas, solo los carneros alfa fueron castrados mediante una técnica semiabierta (24) (Figura 1). En el preoperatorio, se administraron 40.000 UI/kg de penicilina G benzatínica y 2,2 mg/kg de flunixina meglumina por vía intramuscular, más 0,2 mg/kg de acepromazina por vía intravenosa. Después de 15 min, se administraron 20 mL de lidocaína al 2% con epinefrina, divididos de la siguiente manera: 5 mL en cada cordón espermático y 10 mL en el sitio de incisión del saco escrotal. A continuación, se realizó un exfoliante prequirúrgico de la piel escrotal y la orquiectomía fue realizada sistemáticamente por los mismos dos veterinarios (AGP y ESR).
2.4 Evaluación de la grabación de vídeo
A partir de evaluaciones retrospectivas del video, fue posible recoger la frecuencia de las siguientes 5 interacciones sociales, identificando el animal que inició cada comportamiento (iniciador) del que recibió el comportamiento (receptor): (i) cabezazos, cuando un animal (iniciador) golpea a otro animal (receptor) con la cabeza vigorosamente, ya sea empujando con un movimiento de cuello o alejándose al menos 1 paso del receptor); (ii) pisoteo, cuando un animal (iniciador) levanta 1 de las patas delanteras e inmediatamente la baja, golpeando a otro animal (receptor), el comedero o el piso, pudiendo repetir el movimiento varias veces en secuencia, contando cada movimiento como una ocurrencia; (iii) peleas, caracterizadas por cabezazos, patadas en las patas delanteras y empujones mientras dos animales se enfrentan entre sí, siendo el iniciador el que inicia el conflicto y el receptor quien lo recibe; iv) Intento de montura o montura, cuando un animal (iniciador) levanta las extremidades anteriores y apoya el tórax en el cuerpo del otro animal (receptor), caracterizando una montura. Si el receptor evade de modo que el pecho del iniciador no descanse sobre su cuerpo, se caracteriza como un intento de montura; y (v) empuje, cuando un animal (iniciador) ejerce un movimiento de empuje contundente contra otro animal (receptor), obligándolo a moverse (19). El mismo evaluador (ALSC) recogió todas las interacciones sociales observadas. Como se detalla en los métodos estadísticos, se utilizaron las interacciones sociales anteriores para determinar el carnero (alfa) más dominante de cada corral.
Las grabaciones de video también se utilizaron para registrar el intervalo latente (segundos) entre la introducción del comedero y el momento en que un carnero lo tocó con la boca, la frecuencia con la que cada carnero puso su boca en el comedero y la duración (segundos) de la cabeza en o por encima del área del comedero, ya sea mordiendo o masticando. Además, se aplicó la escala de dolor agudo ovino de la Unesp-Botucatu (USAPS) (17). El USAPS comprende seis ítems conductuales (interacción, locomoción, posición de la cabeza, actividad, postura y apetito) clasificados por tres niveles descriptivos en cada ítem (‘0’, ‘1’ y ‘2’). El nivel 0′ indica comportamientos normales (sin asociación con el dolor), y los niveles 1′ y 2′ indican comportamientos proporcionales a la intensidad del dolor. En cada evaluación, se sumaron los ítems del USAPS para obtener la suma total indicativa de la intensidad del dolor. Una suma total de USAPS mayor o igual a 4 indica la necesidad de analgesia (17). Los videos tutoriales de cada comportamiento de USAPS se pueden ver en el sitio web de Animal Pain1 o en la aplicación Vetpain2 o en la publicación anterior (17). El mismo evaluador (KZU) recogió las conductas descritas anteriormente y el USAPS evaluando aleatoriamente todos los vídeos, sin conocer el momento observado (‘análisis ciego’).
Todas las medidas conductuales descritas anteriormente se recogieron en todas las evaluaciones (1ª a 11ª) y para todos los carneros alfa, beta y gamma, independientemente de si estaban castrados o no.
2.5 Análisis estadístico
Todos los análisis estadísticos se realizaron en el software R con el entorno de desarrollo integrado RStudio [Versión 4.0.2 (2020-06-22), RStudio, Inc.]. Las funciones y paquetes se presentaron en el formato «paquete::función» basado en el lenguaje de programación R, y se consideró una significancia del 5% para todas las pruebas.
La frecuencia de los comportamientos iniciador y receptor de las interacciones agonísticas (cabezazos, pisoteos, peleas, monturas o intentos de montura, y empujones) registrada en las 10 sesiones preoperatorias de los 18 carneros se sometió a un análisis de redes sociales (SNA). A partir del número de iniciaciones dividido por el número de recepciones del SNA, se determinó un índice jerárquico social, cuyo incremento indicó una mayor frecuencia de iniciación y una menor frecuencia de recepción de comportamientos sociales (sna::SNA). El carnero alfa de cada bolígrafo estaba determinado por el índice jerárquico social más alto, mientras que el carnero gamma era el que tenía el índice más bajo y el beta el carnero con el valor intermedio. Luego, para comparar el índice jerárquico social (variable resultado) entre las clasificaciones jerárquicas (alfa vs. beta vs. gamma; variable explicativa), se realizó un modelo lineal multinivel (lme4::lmer), incluyendo el bolígrafo como efecto aleatorio. El error residual del modelo (stats::residuals) indicó la adherencia a una distribución gaussiana por gráfica cuantil-cuantil (stats::qqnorm), histograma (stats::hist) y por las pruebas de Shapiro-Wilk (stats::shapiro.test) y Cramer-von Miser (nortest::cvm.test) después de la transformación de Box-Cox (lambda de −0.4244345) (car::p owerTransform). Se realizaron comparaciones múltiples en la prueba post hoc con la prueba de Tukey para comparar las clasificaciones jerárquicas (lsmeans::lsmeans y multcompView::could).
Para explorar las múltiples asociaciones entre las variables que medían el interés en el recurso de alimentación adicional (latencia, frecuencia y duración) con la evaluación del dolor (USAPS), se realizó un análisis de componentes principales (ACP) mediante una matriz de correlación (stats:: princomp). Se utilizó el análisis paralelo de Horn (psych::fa.parallel) para determinar el número óptimo de componentes principales (PC) que se retendrían en el ACP.
Se realizó un modelo para investigar los cambios en las variables durante los tres períodos de evaluación (1º-5º vs. 6º-10º vs. 11º) y entre las clasificaciones jerárquicas (alfa vs. beta vs. gamma). Para ello, se utilizó un modelo de Poisson multinivel inflado por cero (GLMMadaptive:: mixed_model) para USAPS, se utilizó un modelo lineal multinivel (lme4::lmer) para duración y latencia, en el que el error residual del modelo indicó adherencia a una distribución gaussiana por los métodos descritos anteriormente, después de la transformación de latencia de Box-Cox (lambda de −0.3913293), y se utilizó un modelo lineal generalizado multinivel ajustado por distribución de Poisson para la frecuencia. En todos los modelos, las interacciones de tres períodos de evaluación y clasificación jerárquica se utilizaron como efectos fijos, y los carneros anidados en el corral como un efecto aleatorio. Se realizaron comparaciones múltiples en el post-test del modelo como se describió anteriormente.
El análisis para estimar el tamaño de la muestra de carneros alfa se realizó estableciendo 0,80 para la potencia y 0,05 para el nivel de significación (stats::p ower.t.test). Para la suma total del USAPS a las 8 h después de la orquiectomía de los carneros alfa, se alcanzó el delta (6,33) restando la media calculada para los carneros alfa (6,33) y beta (0,00) y la desviación estándar común de todos los carneros alfa y beta (3,11). De acuerdo con los límites antes mencionados, el tamaño de la muestra se estimó en al menos cuatro carneros por clasificación jerárquica (≅ 4,154542).
3 Resultados
El índice jerárquico fue mayor en los carneros alfa y menor en los carneros gamma y beta, lo que demuestra que la clasificación jerárquica adoptada en nuestro estudio fue capaz de identificar el carnero alfa (Figura 3).
Figura 3. Diagrama de caja de las diferencias en el índice jerárquico entre los carneros clasificados como alfa, beta o gamma. Los límites inferior y superior del cuadro representan el primer y tercer cuartil de los datos, respectivamente; la línea horizontal más larga dentro de la caja indica la mediana; el diamante rojo indica la media; los círculos grises indican cada carnero individual; y las letras minúsculas indican diferencias entre clasificaciones (A > B > C); se realizaron comparaciones múltiples mediante Modelos Lineales con post-test por la prueba de Tukey (p < 0.05) después de la transformación de Box-Cox para cumplir con el supuesto de normalidad; sin embargo, se presentan datos sin procesar y sin transformar.
El análisis paralelo de bocina indicó 2 PC como óptimos para ser retenidos en el PCA. Los primeros 2 PC (o dimensiones) de PCA juntos capturaron el 58% de la varianza total, y en el PC1, hubo una asociación positiva entre el USAPS y la duración. Por el contrario, la duración se asoció negativamente con el USAPS en el CP2 (Figura 4 y Tabla 1). Además, el USAPS se ubicó en el cuadrante superior izquierdo, donde hubo una mayor densidad (círculo mayor naranja claro) de la undécima evaluación (post-orquiectomía), carneros alfa y con indicación de recibir analgesia (círculo rosa más grande) en base a un puntaje superior al punto de corte del USAPS. El círculo más grande es el centroide, que indica el centro de masa dado por el polígono formado con la interpolación de los círculos más pequeños del mismo color. Estos resultados sugieren que la UPAPS puede haber estado positivamente relacionada con el dolor postoperatorio.
Figura 4. Diagrama de dispersión bidimensional de análisis de componentes principales de interrelación de las variables (A), distribución de carneros segregados por evaluaciones (B), clasificación jerárquica (C) e indicación analgésica (D). Las evaluaciones de la primera a la décima representan las 2 baterías (5 d cada una) de pruebas conductuales realizadas antes de la orquiectomía, mientras que la undécima evaluación fue posterior a la orquiectomía. Los círculos más pequeños indican cada animal en cada evaluación, y los círculos más grandes indican el centroide. El centroide indica el centro de masa dado por el polígono formado con la interpolación de los círculos más pequeños del mismo color. Las flechas indican los vectores de cada variable.
Tabla 1. Análisis de valores de carga, valores propios y varianza de componentes principales para explorar múltiples asociaciones entre variables utilizadas para medir el interés en un recurso de alimentación adicional en carneros.
La latencia fue estadísticamente equivalente entre las evaluaciones y entre las clasificaciones jerárquicas (Figura 5A). La frecuencia disminuyó de la 6ª-10ª a la 11ª evaluación en todos los carneros y fue estadísticamente equivalente entre las clasificaciones jerárquicas (Figura 5B). La duración disminuyó de la 1ª a la 5ª a la 6ª a la 10ª evaluaciones, sin cambios entre las clasificaciones jerárquicas (Figura 5C). USAPS fue estadísticamente equivalente en las 11 evaluaciones para los carneros beta y gamma, mientras que para los carneros alfa, hubo un aumento en la evaluación final. En la comparación entre las clasificaciones jerárquicas, el alfa tuvo la mayor puntuación de dolor (Figura 5D), clara evidencia de que los carneros experimentaron dolor a las 8 h post-orquiectomía. La distribución de las variables a lo largo de las 11 evaluaciones se puede observar en la Figura Suplementaria S1.
Figura 5. Diagrama de caja de latencia (A), frecuencia (B), duración (C) y escala de dolor agudo ovino de la Unesp-Botucatu (USAPS) (D) durante tres períodos de evaluación (1º-5º y 6º-10º preoperatorio y 11º postoperatorio) en carneros clasificados jerárquicamente como alfa, beta o gamma. Los límites inferior y superior del cuadro representan el primer y tercer cuartil de los datos, respectivamente; la línea horizontal más larga dentro de la caja indica la mediana; el diamante indica la media; los círculos grises indican valores atípicos; las letras mayúsculas indican diferencias entre grupos jerárquicos en la misma evaluación (A > B); las letras minúsculas indican diferencias entre las evaluaciones del mismo grupo jerárquico (a > b); se realizaron comparaciones múltiples por los modelos con un post-test por la prueba de Tukey (p < 0,05); la línea discontinua roja en el gráfico D indica el punto de corte óptimo del USAPS para la indicación de analgesia (≥ 4 puntos); Solo los carneros alfa fueron castrados, pero todos los carneros fueron evaluados en todas las evaluaciones.
4 Discusión
El aspecto novedoso de este estudio fue la investigación del efecto del dolor postoperatorio sobre el interés de los carneros alfa en piensos con acceso limitado. Las interacciones sociales analizadas en la primera y segunda batería de prueba reconocieron niveles de jerarquía entre los carneros del mismo grupo e identificaron consistentemente el carnero alfa. Después de la orquiectomía, los carneros alfa tuvieron puntuaciones altas en el USAPS, lo que confirma el dolor esperado, según lo predicho por la vida media analgésica preoperatoria (23). Sin embargo, los carneros alfa no tienen un interés reducido en el recurso alimenticio altamente disputable en presencia de dolor postoperatorio agudo, rechazando nuestra hipótesis.
Las interacciones agonísticas conductuales se utilizan para determinar la jerarquía social en las ovejas (19, 25). El presente estudio buscó identificar el dolor en carneros sometidos a orquiectomía de una manera más simple, rápida y práctica durante el manejo regular de la alimentación en la ganadería. Se fomentó un ambiente altamente competitivo, común en las granjas de cría, caracterizado por grupos de machos confinados, con la oferta de un alimento preferible, con tiempo y cantidad limitados, para estimular a los animales incluso en presencia de un estímulo doloroso, y analizando su impacto en el acceso al recurso. Además, hay que tener en cuenta que nuestros carneros no fueron sometidos al ayuno, como se ha informado en algunos estudios (21, 22, 26). Como los carneros clasificados como alfa tenían un índice de jerarquía social más alto que los clasificados como beta o gamma, concluimos que nuestra metodología identificó efectivamente el carnero dominante en cada grupo.
El instrumento adoptado para el diagnóstico del dolor agudo (USAPS) (17) en el presente estudio indicó dolor exclusivamente para carneros alfa en la evaluación 8 h después de la orquiectomía, predicho como el pico de dolor postoperatorio debido a la duración del efecto analgésico preoperatorio (23). Aunque el USAPS fue desarrollado y validado inicialmente para evaluar el dolor abdominal inducido por laparoscopia en ovejas hembras, sugerimos que el instrumento era lo suficientemente sensible y específico como para diagnosticar el dolor debido a la orquiectomía en carneros. Otros instrumentos de evaluación del dolor conductual que solo consideran las expresiones faciales (27, 28) no pudieron ser aplicados durante la prueba conductual, ya que los carneros tenían la cabeza gacha, masticando, con el hocico y la boca dentro del comedero, lo que imposibilitaba el análisis de los cambios faciales sutiles. Por lo tanto, debido a las particularidades del diseño experimental, se utilizó un instrumento que consideró el lenguaje de cuerpo entero.
En el presente estudio, la frecuencia y la duración con la que el carnero alfa accedió al comedero adicional cuando se le diagnosticó dolor fueron equivalentes a las de los carneros beta y gamma, lo que sugiere que el dolor agudo no disminuyó el interés de los carneros alfa en un alimento altamente disputable. Sin embargo, observamos una disminución de la frecuencia en los carneros alfa en la 11ª prueba de comportamiento, en comparación con la primera y segunda baterías de evaluación previas, y en los carneros beta y gamma, en comparación con la segunda batería. Estos hallazgos sugieren que otros factores podrían influir en estos resultados (es decir, anhedonia: pérdida o reducción del disfrute de la recompensa). El dolor puede ser un factor estresante que modula las interacciones sociales en animales de laboratorio (29). Con dolor, los ratones presentaron cambios en el comportamiento social y en las relaciones de dominancia masculina (30, 31). Por el contrario, en el presente estudio, la latencia para tocar la boca en el comedero adicional presentó baja variación, con base en el análisis de los componentes principales, sugiriendo que, incluso con dolor, el carnero alfa tardó un tiempo equivalente en acceder al comedero en comparación con cuando estaba en estado libre de dolor. En conjunto, nuestros hallazgos señalan que el dolor agudo no disminuyó el interés de los carneros alfa en un alimento altamente preferible. Como aparentemente esta fue la primera vez que se investigaron los efectos de la jerarquía social en la evaluación del dolor en ovejas, se necesitan más estudios.
En las granjas comerciales de ovejas, se llevan a cabo comúnmente procedimientos dolorosos (castración, corte de cola y mulesing) (3, 4, 10), y las ovejas se utilizan ampliamente en estudios experimentales que involucran condiciones de dolor (2). También experimentan dolor debido a sucesos no planificados (p. ej., enfermedades, lesiones, mastitis, problemas en las pezuñas y distocia) que pueden pasar desapercibidos (9). Por lo tanto, el momento de la alimentación puede ser una excelente oportunidad para detectar cambios conductuales relacionados con el dolor que podrían estar relacionados con el dolor agudo utilizando el USAPS que combina diferentes conductas de mantenimiento y específicas de dolor o malestar para cuantificar el dolor. Sin embargo, este estudio destacó que el dolor agudo posterior a la orquiectomía no reduce el interés de los carneros alfa en los recursos alimenticios, lo que evidencia que la dominancia podría ser un factor de confusión en los comportamientos relacionados con el apetito utilizados para diagnosticar la evaluación del dolor agudo en los carneros alfa.
Este estudio no está exento de algunas limitaciones. Aunque evaluamos solo tres ovejas en cada uno de los seis grupos, hubo suficientes diferencias significativas en el diagnóstico del estado de dolor. A pesar de esto, los estudios futuros podrían hacer esfuerzos para investigar tamaños de grupo más similares a los comunes en los rebaños comerciales. Además, en el presente estudio, analizamos el carnero alfa porque esta es la posición jerárquica más sencilla de identificar y distinguir de los carneros beta y gamma, lo que parece ser una excelente manera de comenzar a estudiar el factor de confusión de la jerarquía en la evaluación del dolor del carnero. Limitamos la evaluación posterior a la orquiectomía a una sola sección, porque si hubiéramos evaluado la respuesta conductual de los carneros alfa más de 1 día después de la castración, esto probablemente habría cambiado la dinámica social, en función de la fuerte disminución de la testosterona 24 h después de la castración reportada en otros mamíferos (32-34). En este caso, la reducción de testosterona representaría un sesgo porque los niveles endógenos de testosterona modulan las conductas agonísticas (35-37). Nuestro estudio representa un primer paso en la comprensión del factor de confusión de la jerarquía social en la evaluación del dolor en ovejas, que nunca antes se había estudiado. El comportamiento de todo el cuerpo, las expresiones faciales y las respuestas fisiológicas (p. ej.: testosterona, biomarcadores séricos de inflamación y frecuencia cardíaca) de los carneros alfa, beta y gamma deben considerarse en estudios futuros.
5 Conclusión
Concluimos que el interés de los carneros alfa en acceder a un recurso alimenticio limitado no ha disminuido como efecto del dolor agudo posterior a la orquiectomía. Durante la cría rutinaria en condiciones de campo, la alimentación podría ser una excelente oportunidad para detectar cambios de comportamiento relacionados con el dolor según el USAPS, ya que los carneros exhiben comportamientos asociados con el dolor agudo incluso durante el acceso a recursos alimenticios limitados, altamente preferibles y disputables. Sin embargo, nuestros hallazgos sugieren que la dominancia podría ser un factor de confusión en los comportamientos relacionados con el apetito que detectan la evaluación del dolor agudo en los carneros alfa, ya que el dolor agudo no afectó su interés en acceder a los recursos alimenticios limitados.
Declaración de disponibilidad de datos
Los datos brutos que respaldan las conclusiones de este artículo serán puestos a disposición por los autores, sin reservas indebidas.
Declaración ética
El estudio en animales fue aprobado por el Comité de Ética en el Uso de Animales – FMVZ – Unesp. El estudio se llevó a cabo de acuerdo con la legislación local y los requisitos institucionales.
Contribuciones de los autores
KU: Curación de datos, Investigación, Visualización, Escritura – borrador original. PT: Conceptualización, Curación de datos, Análisis formal, Obtención de fondos, Investigación, Metodología, Administración de proyectos, Redacción – borrador original, Redacción – revisión y edición. PR: Investigación, Administración de proyectos, Redacción – borrador original, Redacción – revisión y edición. AC: Curación de datos, Investigación, Redacción – borrador original. LB: Investigación, Escritura – borrador original. MT: Investigación, Escritura – borrador original. HG: Investigación, Escritura – borrador original. AP: Investigación, Administración de proyectos, Redacción – borrador original. RD: Investigación, Escritura – borrador original. ER: Investigación, Escritura – borrador original. JK: Adquisición de fondos, redacción, revisión y edición. JF: Conceptualización, Obtención de fondos, Metodología, Supervisión, Redacción – borrador original, Redacción – revisión y edición.
Financiación
El/los autor/es declara(n) que se recibió apoyo financiero para la investigación, autoría y/o publicación de este artículo. Se agradece el apoyo financiero de la FAPESP (Beca #2020/15556-8 y #21/12358-3), de la CAPES (Código 001), del PIBC-Unesp (Beca #3849), del Programa de Posgrado en Biotecnología Animal – Unesp y de la FMVZ Unesp., Botucatu.
Conflicto de intereses
Los autores declaran que la investigación se llevó a cabo en ausencia de relaciones comerciales o financieras que pudieran interpretarse como un posible conflicto de intereses.
Nota del editor
Todas las afirmaciones expresadas en este artículo son únicamente las de los autores y no representan necesariamente las de sus organizaciones afiliadas, ni las del editor, los editores y los revisores. Cualquier producto que pueda ser evaluado en este artículo, o afirmación que pueda ser hecha por su fabricante, no está garantizado ni respaldado por el editor.
Material complementario
El material complementario para este artículo se puede encontrar en línea en: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fvets.2024.1299550/full#supplementary-material
Notas
1. ^https://animalpain.org/en/ovelhas-dor-en/
2. ^https://play.google.com/store/apps/details?id=com.vetpain.app
Referencias
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Palabras clave: apetito, dominancia, jerarquía, evaluación del dolor, ovejas
Cita: Uzae KZ, Trindade PHE, Rattes PZ, Campos ALdS, Bornal LG, Teixeira MB, García HDM, Pupulim AG, Denadai R, Rossi EdS, Kastelic JP y Ferreira JCP (2024) El dolor agudo posterior a la orquiectomía no reduce el interés de los carneros alfa en los recursos alimenticios. Frente. Vet. Sci. 11:1299550. doi: 10.3389/fvets.2024.1299550
Editado por:
Laura Ann Boyle, Centro de Investigación Alimentaria de Teagasc, Irlanda
Revisado por:
Ismael Hernández Ávalos, Universidad Nacional Autónoma de México, México
Thomas Ede, Universidad de Pensilvania, Estados Unidos
Copyright © 2024 Uzae, Trindade, Rattes, Campos, Bornal, Teixeira, García, Pupulim, Denadai, Rossi, Kastelic y Ferreira. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la Licencia Creative Commons Attribution License (CC BY).
*Correspondencia: João Carlos Pinheiro Ferreira, joao.cp.ferreira@unesp.br
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