Establecimiento de un sistema de genética inversa para una cepa epidémica de rotavirus porcino JXAY01 tipo G5P[23]I12

Establecimiento de un sistema de genética inversa para una cepa epidémica de rotavirus porcino JXAY01 tipo G5P[23]I12

Establecimiento de un sistema de genética inversa para una cepa epidémica de rotavirus porcino JXAY01 tipo G5P[23]I12

Changjin Liu,Changjin Liu1,2Huangsiwu Wei,Huangsiwu Wei1,3Xingyi ZhangXingyi Zhang1Wenjie WuWenjie Wu1Zhengqiao ShenZhengqiao Shen1Feng LuoFeng Luo4Shunzhou Deng
Shunzhou Deng1*
  • 1Departamento de Medicina Veterinaria Preventiva, Facultad de Ciencia y Tecnología Animal, Universidad Agrícola de Jiangxi, Nanchang, China
  • número arábigoFacultad de Ciencias de la Vida, Universidad Normal de Nanchang, Nanchang, China
  • 3Jardín Botánico de Lushan, provincia de Jiangxi y Academia China de Ciencias, Lushan, China
  • 4Compañía de biotecnología Jiangxi Jinyibo, Nanchang, China

El rotavirus porcino es uno de los patógenos más importantes que causan diarrea en lechones recién nacidos, y el genoma de este virus contiene 11 segmentos de ARN bicatenario, que son fáciles de recombinar entre cepas para producir nuevas cepas con diferentes propiedades antigénicas. El sistema de genética inversa es una herramienta informativa para el estudio de la biología de los virus. Recientemente, se desarrollaron sistemas de genética inversa adaptables basados en plásmidos para la cepa OSU de rotavirus porcino; sin embargo, tales sistemas no han sido desarrollados para genotipos epidémicos de rotavirus porcino en China. En este estudio, establecimos con éxito un sistema genético inverso basado en una cepa epidémica de rotavirus porcino JXAY01 aislada en los últimos años, que se caracterizó por una constelación de genotipos específica: G5-P[23]-I12-R1-C1-M1-A8-N1-T7-E1-H1. Se clonaron 11 segmentos de genes del rotavirus porcino JXAY01 en vectores plásmidos similares al sistema SA11. Los plásmidos del segmento del genoma JXAY01 se transfectaron conjuntamente con 10 plásmidos complementarios del genoma SA11, y se rescataron con éxito 11 cepas monorreordenadas. Los análisis de replicación viral de la cepa parental SA11 y las cepas monorreordenantes mostraron que los monorreordenantes de reemplazo de proteínas estructurales habían reducido la proliferación celular en comparación con las cepas parentales de reemplazo de proteínas SA11 y no estructurales. La cepa recombinante rJXAY01 pudo ser rescatada con éxito utilizando 11 plásmidos pRG-JXAY01. La secuenciación del genoma completo mostró diferencias de 12 aminoácidos entre el aislado JXAY01 y el recombinante rJXAY01, pero no hubo diferencias significativas en su capacidad de replicación in vitro. Este estudio informa sobre el sistema genético inverso, que sienta las bases para una mayor comprensión de la biología molecular del rotavirus porcino y el desarrollo de nuevas vacunas.

 

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