La tuberculosis caprina (TB) es una zoonosis causada por miembros del complejo Mycobacterium tuberculosis (MTBC). Los programas de erradicación de la tuberculosis caprina se basan principalmente en pruebas de tuberculina intradérmica y vigilancia de mataderos. Sin embargo, el uso de pruebas serológicas se ha ampliado como una posible herramienta de diagnóstico en cabras mediante el uso de muestras de suero, plasma o incluso leche. La producción de leche y los anticuerpos (Ab) presentes en la leche pueden variar dependiendo de varias circunstancias. En el presente estudio, se analizaron diferentes factores que pueden afectar el rendimiento del diagnóstico de tuberculosis humoral utilizando muestras de leche de cabra: 1) etapa de lactancia, 2) una prueba cutánea previa reciente (efecto refuerzo) y 3) el efecto de los ciclos de congelación-descongelación en muestras de leche conservadas con azidiol. Se seleccionaron animales infectados por TB (n = 44) para evaluar la evolución de los niveles de Ab durante el período de lactancia de 6 meses, junto con su efecto potencial en los resultados de P22 ELISA. En general, no se observaron cambios significativos (p = 0,079) a lo largo del estudio con respecto a los niveles de Ab en muestras de leche entre análisis consecutivos, aunque la reactividad a P22 ELISA disminuyó cuando se realizaron muestreos en los últimos dos meses de lactancia. En cuanto al efecto refuerzo, los resultados cuantitativos mostraron una variación significativa (p < 0,001) tanto para la leche como para las muestras de suero cuando se llevaron a cabo pruebas serológicas 15 días después de la prueba cutánea. Finalmente, no hubo diferencias significativas (p = 0,99) en los resultados de P22 ELISA al usar muestras de leche conservadas con azidiol que habían pasado por ciclos de congelación-descongelación.