Resumen

Introducción: 

Las células de estrés (Muse) diferenciadoras de múltiples linajes, una subpoblación de células madre mesenquimales (MSCs) caracterizadas por antígeno embrionario específico de etapa 3 (SSEA3), presentan una capacidad regenerativa superior en comparación con las MSC convencionales, incluyendo un aumento del homing tisular, pluripotencia y efectos paracrinos. Sin embargo, su escasez natural (1–5% en poblaciones de MSC) limita la escalabilidad terapéutica. En este estudio, desarrollamos un método de cinco moléculas pequeñas para obtener MSCs enriquecidas con compuestos similares a Muse y evaluamos su posible uso en el tratamiento de enfermedades crónicas veterinarias graves, como la hepatitis y la enfermedad renal crónica (ERC).

Métodos: 

Resultados:

El cribado de más de 100 compuestos de moléculas pequeñas identificó cócteles optimizados de cinco compuestos — ácido valproico (0,5 mM), CHIR99021 (3 μM), PD0325901 (0,5 μM), Trolox (10 μM) y nicotinamida (1 mM) para MSCs felinos; parnate (10 μM), CHIR99021 (3 μM), PD0325901 (0,5 μM), Trolox (10 μM) y Y27632 (10 μM) para MSCs caninos. Estos cócteles de moléculas pequeñas aumentaron eficazmente la positividad de SSEA3, del 0,1–1% a aproximadamente el 40%, como confirmaron la tinción por inmunofluorescencia y la citometría de flujo. Estas células enriquecidas tipo Muse demostraron una tolerancia al estrés superior y una diferenciación espontánea robusta en líneas endodérmicas (KRT7 + hepatocitos), mesodérmicas (cTnI+ tipo cardiomiocito) y ectodérmicas (progenitores neurales de Nestin+) bajo condiciones de inducción específicas, que no se observaron en MSC no tratadas. En aplicaciones terapéuticas, las MSCs enriquecidas tipo Muse normalizaron los índices hepáticos felinos al día 21 y mejoraron los marcadores renales caninos al día 28, acompañados de notables efectos antienvejecimiento.