1 Introducción

La superficie ocular y las enfermedades oculares contribuyen al estado de la superficie ocular. La inflamación, la irritación y la opacificación de la superficie corneal afectan la calidad de vida. La superficie ocular incluye la película lagrimal, la conjuntiva, la córnea, los párpados y las glándulas lagrimales. Por lo tanto, aunque el término enfermedad de la superficie ocular (OSD) se utiliza a menudo como sinónimo de enfermedad del ojo seco (DED) en medicina humana, los aspectos clínicos de la DED pertenecen a un grupo de OSD que también incluye otras enfermedades, como la blefaritis, la disfunción de las glándulas de Meibomio, las enfermedades oculares alérgicas y otras afecciones que afectan a las superficies oculares. Las enfermedades que afectan a estas estructuras causan OSD, y los pacientes a menudo presentan signos clínicos de irritación ocular, enrojecimiento y reducción de la agudeza visual (1, 2).

El término DED es sinónimo del término «queratoconjuntivitis seca» (KCS) en medicina veterinaria. En la actualidad, el único criterio estándar utilizado para el diagnóstico del SCC es la prueba de desgarro de Schirmer 1 (STT-1). Sin embargo, dado que no abarca todo el concepto de DED, los estudios han tenido como objetivo desarrollar nuevos métodos diagnósticos (3-6). La evaluación de la salud de la superficie ocular es vital para la detección precoz de la DED precoz. La prueba no invasiva de tiempo de ruptura de la película lagrimal (NIBUT), la prueba clásica de tiempo de ruptura de la película lagrimal con tinción con fluoresceína (TFBUT) y la vista ampliada bajo biomicroscopía con lámpara de hendidura son métodos comúnmente utilizados para evaluar la superficie de la córnea y la película lagrimal. También se han utilizado exámenes adicionales, como STT-1, tonometría de presión intraocular, tomografía de coherencia óptica (OCT), microscopía confocal in vivo, meibografía e interferometría, para evaluar más a fondo el estado de la película lagrimal (7, 8).

Muchas técnicas diagnósticas, como NIBUT, TFBUT, meibometría, osmolaridad lagrimal e interferometría, se centran en la estabilidad de la película lagrimal. La estabilidad de la película lagrimal se refiere a la tasa de evaporación de la película lagrimal. La película lagrimal constituye muchos componentes, a saber, la capa lipídica superficial, la capa acuosa superpuesta e intercambiable y la capa de mucina. Estos componentes trabajan juntos para crear una película lagrimal estable. Las enfermedades, los factores ambientales y otros factores, como la edad y los antecedentes de cirugía ocular, pueden causar una ruptura excesiva de la película lagrimal (1).

Se han realizado varios estudios sobre los resultados de otras técnicas diagnósticas utilizadas para la detección de la DED en medicina veterinaria; sin embargo, aún no se ha establecido un estándar (4-6, 9-12). Una de estas técnicas diagnósticas, NIBUT, fue introducida por primera vez en medicina humana por Mengher et al. (13). Es un método no invasivo, sin colorantes que ha sido ampliamente utilizado en la práctica clínica. Los sistemas NIBUT comúnmente utilizados en medicina veterinaria se implementan directamente desde la medicina humana; Sin embargo, la falta de criterios estándar ha aumentado la necesidad de nuevos enfoques que utilicen pruebas diagnósticas basadas en imágenes. Ningún estudio previo se ha centrado en la correlación entre la progresión de la enfermedad y los resultados de las pruebas diagnósticas, que pueden reflejar el pronóstico de la enfermedad en una determinada etapa en función del resultado de la prueba. En este estudio, se ha utilizado una versión modificada del sistema NIBUT original desarrollado por Mengher et al. (13), que arroja una iluminación en forma de cuadrícula sobre la superficie corneal, como método diagnóstico para evaluar el estado de la superficie ocular. Estudios previos sobre el uso del sistema NIBUT de iluminación de línea de cuadrícula utilizaron una placa iluminadora adicional sobre los biomicroscopios oftálmicos de lámpara de hendidura comúnmente distribuidos (14). Las líneas cuadradas de la cuadrícula de luz reflejadas en la superficie de la córnea representan la película lagrimal precorneal (PTF), y la perturbación o disrupción de estas líneas representa la ruptura de la película lagrimal (14).

El objetivo de este estudio fue evaluar el estado de la superficie ocular y comparar los cambios en la opacidad corneal a lo largo del tratamiento para determinar la correlación entre el estado de la superficie ocular y el pronóstico de la opacificación corneal.

2 Materiales y métodos

Entre los pacientes que visitaron el Hospital Docente de Medicina Veterinaria (VMTH) de la Universidad de Konkuk entre el 5 de agosto de 2020 y el 1 de octubre de 2021, 50 perros (96 ojos) se sometieron a exámenes con el iluminador de línea de cuadrícula (NIBUT). El VMTH, de la Universidad de Konkuk, solicita a los propietarios de los animales inscritos en un estudio que proporcionen un formulario de consentimiento del paciente como procedimiento de rutina. Este formulario notifica a los propietarios que la información del paciente obtenida durante el tratamiento puede ser utilizada con fines de investigación. El estudio fue aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Konkuk (nº de protocolo: KU20123). Todos los dueños de mascotas dieron su consentimiento informado por escrito.

Se utilizó el siguiente método para evaluar NIBUT con el iluminador de línea de cuadrícula. Biomicroscopio con lámpara de hendidura (GS LED Slit Lamp MW50D, Shigiya machinery works LTD., Japón) con un iluminador de placa de rejilla adicional hecho a medida (una placa de 42 cm × 33 cm con luces LED correspondientes a un total de 19 cuadrados × 15 cuadrados de 2 cm² en la cuadrícula de tamaño) para obtener un video de 20 segundos de las imágenes de todos los pacientes (Figuras 1, 2) (14). Todos los videos fueron grabados antes de realizar cualquiera de los otros exámenes. La grabación del video se inició una vez que el asistente abrió los ojos de los pacientes con una fuerza suave. Los pacientes fueron mínimamente restringidos para evitar que parpadearan durante el examen. La grabación de video de NIBUT continuó hasta que se obtuvo una imagen clara que pudiera juzgarse objetivamente, y el examen concluyó con la adquisición de un video de 20 segundos adecuado para la evaluación de la línea de cuadrícula. Se excluyeron las imágenes que no cubrían toda la córnea. Todas las pruebas se realizaron en una habitación con la temperatura establecida entre 20 °C y 25 °C y la humedad entre 30 y 40%. Todas las fuentes de ventilación se apagaron antes del examen para reducir la interferencia de factores que pueden afectar los resultados de la prueba. Todas las imágenes fueron analizadas por un solo observador (M.G.H) para minimizar el riesgo de sesgo de subjetividad que puede ocurrir si los análisis son realizados por varios examinadores. Se inició un temporizador de cuenta atrás desde el inicio del video y se detuvo tan pronto como el observador detectó cualquier ruptura o distorsión de las líneas rectas de la cuadrícula.

La prueba TFBUT de tinción con fluoresceína se realizó disolviendo una tira estéril de 1 mg de fluoresceína en 0,2 ml de solución estéril de cloruro de sodio al 0,9%, que luego se instiló en la superficie ocular. A los pacientes se les permitió parpadear un par de veces, y el temporizador de conteo se inició mientras los párpados se abrían con una fuerza suave y se examinaban bajo luz azul cobalto. El momento en el que el examinador detectó la ruptura de la película lagrimal teñida con fluoresceína se marcó para cada paciente. La ruptura se define como una mancha seca en la película lagrimal teñida de tinte en la que se interrumpe la luz verde, revelando manchas oscuras sin película lagrimal (15-17). Este proceso se repitió un total de tres veces y se calculó el valor promedio.

El valor numérico de los resultados de las pruebas NIBUT se comparó con los de los informes médicos humanos. Dado que los ojos glaucomatosos pueden afectar a los resultados de la opacidad corneal, se excluyeron del estudio los pacientes con presión intraocular (PIO) no controlada. En este estudio se incluyeron los pacientes que cumplían los siguientes criterios: PIO no superó los 20 mmHg tras la administración de los primeros fármacos antiantiglaucoma y ausencia de opacificación corneal tras volver a la PIO basal. Del mismo modo, también se excluyeron los pacientes con sospecha de enfermedades endoteliales corneales, que probablemente progresen a la opacificación corneal. De acuerdo con los informes en medicina humana, el valor de corte para la normalidad de los resultados de TFBUT y NIBUT es de >10 s, con valores <5 s que indican DED grave (17, 18). Los resultados de NIBUT y TFBUT de los pacientes incluidos en este estudio se dividieron en tres grupos: el grupo grave (designado como Grupo 1, con un tiempo de ruptura de la película lagrimal de <5 s), el grupo leve (Grupo 2, con un tiempo de ruptura de la película lagrimal de 5-10 s) y el grupo normal (Grupo 3, con un tiempo de ruptura de la película lagrimal de >10 s). Los resultados de STT-1 de los pacientes incluidos en este estudio también se dividieron en tres grupos: el grupo grave (Grupo 1, valor inferior a <5 mm/min), el grupo moderado (Grupo 2, valor entre 5-10 mm/min) y el grupo normal (Grupo 3, valor >10 mm/min) (Figura 3).

Figura 3. Ejemplos de las imágenes de vídeo no invasivas del tiempo de ruptura de la película lagrimal (NIBUT) examinadas, que muestran una serie de imágenes cada 5 s para cada grupo. (A) Caso número 18 del grupo 1 de NIBUT, donde todas las imágenes más allá de 5 s contienen líneas de cuadrícula interrumpidas (flechas). (B) Caso número 29 del grupo 2 de NIBUT, con imágenes de más de 10 s que muestran líneas de cuadrícula interrumpidas (puntas de flecha). (C) NIBUT grupo 3, que muestra imágenes sin interrupción de las líneas de cuadrícula hasta 20 s.

A todos los pacientes se les realizaron exámenes oftalmológicos completos, como STT-1, PIO y biomicroscopía con lámpara de hendidura. Se recopilaron la historia clínica y los datos de seguimiento de los pacientes para evaluar los cambios en la opacificación corneal de acuerdo con el sistema de clasificación de la opacidad corneal utilizado en medicina humana. El grado de opacidad corneal se determinó mediante biomicroscopía con lámpara de hendidura. Las calificaciones se dividen en cuatro puntajes, que van de 0 a 3, con base en el sistema reportado por Fantes et al. (19). La puntuación de grado de opacidad corneal (COS) de 0 indica una córnea completamente clara o la presencia de un rastro de opacidad. Un COS de 1 indica la presencia de una opacidad corneal prominente que no interfiere con la visibilidad de los detalles finos del iris. Un COS de 2 indica la presencia de una opacidad que oscurece la visibilidad del iris y los detalles de la lente. Un COS de 3 indica una obstrucción severa de la visibilidad de la estructura intraocular. Se recogieron datos sobre las puntuaciones iniciales (en el momento del examen NIBUT), las puntuaciones del grado de opacidad corneal, los resultados NIBUT y los resultados TFBUT de los pacientes. Los datos de seguimiento contenían COS. El COS inicial se refiere a la puntuación medida en el momento del examen NIBUT, mientras que el COS final se refiere al COS más alto medido durante las visitas de seguimiento. El valor final de COS se adoptó a partir del último examen al menos 150 días después de la primera prueba. Los pacientes con daño corneal iatrogénico, como los que se sometieron a cirugía intraocular, fueron excluidos del proceso de puntuación durante 1 mes de tiempo como tiempo de espera debido a la cicatrización de la herida corneal que puede reducir la opacidad corneal.

Los datos fueron analizados con el programa SPSS (Statistical Package for the Social Sciences versión 28 para una ventana; IBM). Se utilizó el análisis de varianzas de una vía (ANOVA) para evaluar los cambios en el COS durante las visitas de seguimiento, la diferencia en el COS en el punto final y las diferencias entre los resultados de NIBUT, TFBUT y STT-1. El ANOVA es un método estadístico utilizado para comparar las medias de tres o más grupos independientes para determinar si existe una diferencia estadísticamente significativa entre ellos. Es una extensión de la prueba t, que se utiliza para comparar medias entre dos grupos. El aspecto «unidireccional» se refiere al análisis que se realiza sobre una sola variable independiente que categoriza los grupos. Posteriormente, dependiendo del supuesto de homocedasticidad, se realizó la prueba de Games-Howell y la prueba post-hoc de Bonferroni para confirmar estos resultados. Las pruebas post-hoc son necesarias para establecer inferencias válidas sobre las diferencias específicas de los grupos después de un ANOVA inicial que indique las diferencias generales entre los grupos. Proporcionan un enfoque metodológico para determinar dónde se encuentran las diferencias, garantizando así la fiabilidad y validez de las conclusiones estadísticas. Además, se realizó una comparación de las diferencias de medias entre los resultados de NIBUT, TFBUT y STT-1 mediante ANOVA.

3 Resultados

La cohorte de estudio estuvo compuesta por 28 machos castrados (MC), tres machos intactos (IM), 16 hembras esterilizadas (SF) y tres hembras intactas (IF). En este estudio se evaluaron 48 ojos derechos (DO) y 48 ojos izquierdos (OS). La población de estudio estuvo compuesta por Caniches (n = 14), Maltés (n = 12), Shih-Tzu (n = 8) y otras razas, como Bichón Frisé, Chihuahua, Cocker Spaniel, Cotón de Tulear, Pincher Miniatura, Spitz, Pug y Yorkshire Terrier. La edad media de los pacientes fue de 7,80 ± 3,65 años (media ± desviación estándar).

En la Tabla Suplementaria S1 se presentan los datos iniciales de los resultados de las pruebas STT-1, NIBUT y TFBUT de fluoresceína, junto con el COS durante los exámenes iniciales y finales. Los casos que no cumplían con los criterios (20 patentes en total) se excluyeron del análisis de los datos. Por ejemplo, se excluyó el caso 22 debido a un antecedente de lesión química corneal grave aguda resultante del uso de champú. En consecuencia, 30 pacientes (54 ojos) fueron evaluados después de aplicar los criterios de inclusión (Tabla Suplementaria S1). Los 30 pacientes (54 ojos) que volvieron a visitar para chequeos y seguimientos regulares fueron evaluados durante cada visita de seguimiento para determinar el COS. La duración media entre dos exámenes COS (54 ojos) fue de 277,70 ± 109,38 días. La Figura 4 ilustra la correlación entre los valores medidos por NIBUT y TFBUT, mientras que la Figura 5 proporciona una descripción de los resultados del análisis estadístico de NIBUT y TFBUT.

Las imágenes microscópicas con lámpara de hendidura adquiridas en cada visita de seguimiento se analizaron para medir el COS. Los pacientes con heridas corneales no se sometieron a imágenes durante un período mínimo de 2 semanas para excluir las imágenes que mostraban una opacificación corneal aguda que puede resolverse a medida que la herida corneal cicatriza. La diferencia de medias en COS durante las visitas de seguimiento en cada grupo, es decir, los Grupos 1, 2 y 3, de NIBUT fue de 0,61 ± 0,92 (n = 28), 0,10 ± 0,32 (n = 10) y 0,19 ± 0,40 (n = 16), respectivamente. La diferencia de medias en COS para toda la población estudiada fue de 0,39 ± 0,74 (n = 54). Los grupos NIBUT mostraron una correlación significativa con el COS (ANOVA, valor p = 0,073) con un nivel de significación del 10%. La prueba post-hoc de Games-Howell con un nivel de significancia del 10% reveló correlaciones significativas entre los Grupos 1 y 2 (p-valor = 0,041) y entre los Grupos 1 y 3 (p-valor 0,104). No se observó correlación significativa entre los Grupos 2 y 3 (p-valor 0,813) (Tabla 1).

La diferencia de medias en el COS durante las visitas de seguimiento en cada grupo, es decir, los Grupos 1, 2 y 3, de TFBUT fue de 0,58 ± 0,90 (n = 12), 0,22 ± 0,43 (n = 18), 0,42 ± 0,83 (n = 24), respectivamente. La diferencia de medias en COS para toda la población estudiada fue de 0,39 ± 0,74 (n = 54). Los grupos TFBUT no mostraron ninguna correlación significativa con el COS (ANOVA, p-valor = 0,417). La prueba post-hoc de Bonferroni con un nivel de significancia del 10% no reveló correlación significativa entre los Grupos 1, 2 y 3 (Tabla 2).

Tabla 2. Resultados de (a) ANOVA y (b) la prueba post-hoc de Bonferroni para los cambios en COS y TFBUT.

La diferencia de medias en COS durante las visitas de seguimiento para cada grupo, es decir, los grupos 1, 2 y 3, de STT-1 fue de 0,5 ± 0,71 (n = 2), 0,33 ± 0,58 (n = 3), 0,39 ± 0,76 (n = 49), respectivamente. La diferencia de medias en COS para toda la población estudiada fue de 0,39 ± 0,74 (n = 54). Los grupos STT-1 no mostraron correlación significativa con COS (ANOVA, p-valor = 0,970). La prueba post-hoc de Bonferroni con un nivel de significancia del 10% no reveló correlación significativa entre los Grupos 1, 2 y 3 (Tabla 3). La diferencia de medias entre los resultados de NIBUT, TFBUT y STT-1 se evaluó mediante ANOVA. Los resultados de las pruebas se correlacionaron significativamente con las pruebas (p-valor = 0,000). La prueba post-hoc de Games-Howell con un nivel de significancia del 10% reveló correlaciones significativas entre NIBUT y TFBUT (p-valor = 0,076), entre NIBUT y STT-1 (p-valor 0,000) y entre TFBUT y STT-1 (p-valor = 0,000) (Tabla 4).

4 Discusión

La película lagrimal precorneal (PTF, por sus siglas en inglés) es una parte de la superficie ocular, que incluye la conjuntiva, la córnea, los párpados y las glándulas lagrimales. El mecanismo de defensa del PTF protege las estructuras oculares, y las anomalías en esta función conducen finalmente al desarrollo de la enfermedad de la superficie ocular (OSD). La OSD es un concepto utilizado para describir un grupo de enfermedades, como la blefaritis, la disfunción de las glándulas de Meibomio, las enfermedades oculares alérgicas y, con mayor frecuencia, y casi como sinónimo, la DED. El taller de ojo seco II (DEWS II) realizado por la Sociedad de Película Lagrimal y Superficie Ocular (TFOS) en 2017 afirma que la capacidad de mantener una película lagrimal intacta juega un papel vital en la protección de la superficie ocular (1). Se han introducido varios métodos diagnósticos para la evaluación de la estabilidad de la película lagrimal. Estos métodos incluyen la administración de cuestionarios, a saber, el índice de enfermedad de la superficie ocular (OSDI) y el cuestionario de ojo seco −5 ítem (DEQ-5), y la evaluación de NIBUT, TFBUT, prueba de calidad lipídica y altura del menisco lagrimal. Un criterio importante para el diagnóstico de la DED son los resultados de los cuestionarios. Sin embargo, no es posible considerar todos los aspectos de la DED en pacientes veterinarios, ya que no pueden explicar el alcance de los síntomas clínicos por sí mismos. Varios estudios en medicina humana han definido la severidad de la DED basándose en pruebas basadas en imágenes, además de resultados subjetivos como cuestionarios (2). Estas pruebas aún no se han adaptado a los pacientes veterinarios; Por lo tanto, muchos informes sugieren la aplicación de estas pruebas a la medicina veterinaria y tienen como objetivo establecer los datos de referencia para los animales. Por lo tanto, los valores numéricos para evaluar los resultados de NIBUT de los pacientes veterinarios se adoptaron de los informes de medicina humana y se designaron como Grupos 1, 2 y 3.

En el presente estudio, las pruebas STT-1, NIBUT y TFBUT se realizaron juntas para evaluar qué resultado tenía más importancia en la predicción de cambios en COS a lo largo del tiempo. Si bien STT-1 sirve principalmente como método de diagnóstico para evaluar la deficiencia cuantitativa de lágrimas, tanto TFBUT como NIBUT evalúan la deficiencia cualitativa de lágrimas. Los resultados de este estudio confirmaron que NIBUT es más fiable en la predicción de los cambios en COS que STT-1 y TFBUT. Se han publicado algunos estudios sobre la correlación entre TFBUT y NIBUT en medicina humana (20, 21). Sin embargo, los resultados de estos estudios variaron. NIBUT fue más largo en un estudio, mientras que TFBUT fue más largo en otro estudio (20, 21). Sin embargo, hasta donde saben los autores, ningún estudio ha determinado cuál de estos dos valores es más sensible a los cambios en la córnea. Es difícil encontrar estudios que comparen NIBUT y TFBUT en medicina veterinaria, y se obtuvieron valores relativamente similares cuando se compararon NIBUT y TFBUT en estos estudios (11, 22). Sin embargo, como los valores se compararon en perros normales, no es apropiado aplicarlos directamente en la práctica clínica.

El examinador debe observar directamente el secado del tinte de fluoresceína en el ojo del paciente para examinar el TFBUT; Por lo tanto, la intervención subjetiva es inevitable. Además, el colorante de fluoresceína utilizado en TFBUT desestabiliza fuertemente la película lagrimal, lo que conduce a una variabilidad en el volumen y la densidad de la fluoresceína aplicada, especialmente con tiras impregnadas de fluoresceína. Estos factores plantean dudas sobre la reproducibilidad de los resultados en la práctica clínica, y la estabilidad de las lágrimas puede verse aún más comprometida después de un examen TFBUT con colorante fluoresceína. Dadas estas limitaciones, desarrollamos este método de diagnóstico utilizando NIBUT en lugar de TFBUT. Un método objetivo alternativo es NIBUT. Un método para examinar NIBUT en oftalmología veterinaria es mediante el uso de ICP OSA-VET (OSA; SBM Sistemi, Italia) (4). Este dispositivo ayuda a analizar la DED mediante la evaluación de las capas acuosas, de mucina y lipídicas de las lágrimas. Este dispositivo es relativamente fácil de usar y se asocia con una buena objetividad (14). Sin embargo, es relativamente caro y funciona independientemente de un biomicroscopio con lámpara de hendidura. Por lo tanto, aunque el examen con un microscopio con lámpara de hendidura se realiza de forma rutinaria en la práctica clínica, se considera inconveniente realizar un análisis separado para la DED utilizando AOS. En este estudio, se utilizó el dispositivo de rejilla del biomicroscopio con lámpara de hendidura para iluminar la córnea, formando así una línea de rejilla en la córnea. Posteriormente, se obtuvieron videos utilizando el equipo de imagen digital del biomicroscopio de lámpara de hendidura, y se analizaron para medir el NIBUT. Este método de evaluación mediante imágenes de vídeo puede aumentar la precisión del examen. Además, permite la evaluación simultánea de toda la córnea. Con la utilización de la inteligencia artificial, este dispositivo también puede mejorar la objetivación de NIBUT (14).

Este estudio tiene ciertas limitaciones. En primer lugar, en este estudio se utilizó una luz LED de rejilla. Las líneas con patrones de cuadrícula se asocian con la desventaja de que el ancho entre las líneas en las áreas central y periférica de la córnea parece diferente a las líneas circulares. Puede ser necesario crear una línea concéntrica para una inspección más precisa. En segundo lugar, en la prueba de significación, el intervalo de confianza se verificó en un nivel de significación del 10%. Se consideró apropiado verificar el intervalo de confianza dentro de un rango del 10% en la prueba de significación, ya que obtener un número suficiente de casos que cumplieran con los criterios era un desafío, lo que llevó a un intervalo de confianza más amplio para la verificación. Sin embargo, será necesario recopilar más datos y verificar si hay significación en la prueba de significación dentro de un nivel del 5% en el futuro. En tercer lugar, el período de seguimiento no fue coherente. La duración de los dos exámenes de COS debe ser la misma para todos los pacientes para permitir una evaluación precisa.

A pesar de varios factores de exclusión y limitaciones experimentales en esta prueba, el método empleado en este estudio fue capaz de obtener fácilmente imágenes de 20 s de pacientes oftalmológicos generales. Se validó que este método podría servir como base para desarrollar un modelo predictivo de cambios en la córnea. A través de este estudio, creemos que seremos capaces de diagnosticar la OSD precoz y establecer un modelo predictivo de las enfermedades de la córnea basado en este examen.

En conclusión, utilizando la prueba NIBUT de la placa de iluminación de línea de cuadrícula, los ojos con un tiempo de ruptura de <5 s tienen una probabilidad significativamente mayor de tener una mayor puntuación de opacidad corneal en comparación con aquellos con un tiempo de ruptura de >5 s. Entre NIBUT, STT-1 y TFBUT, NIBUT fue la única prueba que mostró una asociación significativa con los cambios en el COS. NIBUT puede considerarse una prueba útil para determinar el estado de la superficie ocular en base a los resultados de este estudio. Se recomienda un cuidado ocular diligente para los ojos con un NIBUT de <5 s. Se justifican más investigaciones con una población más grande en ambiente controlado.

Declaración de disponibilidad de datos

Las contribuciones originales presentadas en el estudio se incluyen en el artículo/Material complementario, las consultas posteriores pueden dirigirse al autor correspondiente.

Declaración ética

Los estudios en animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Konkuk (n.º de protocolo: KU20123). Los estudios se llevaron a cabo de acuerdo con la legislación local y los requisitos institucionales. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de los propietarios para la participación de sus animales en este estudio.

Contribuciones de los autores

SJL: Conceptualización, Análisis formal, Redacción – borrador original, Redacción – revisión y edición. MGH: Curación de datos, Análisis formal, Redacción – borrador original. SJY: Curación de datos, Análisis formal, Redacción – borrador original. YSC: Curación de datos, Análisis formal, Redacción – borrador original. JYK: Conceptualización, Análisis formal, Administración de proyectos, Supervisión, Redacción – borrador original, Redacción – revisión y edición.

Financiación

El/los autor/es declara(n) haber recibido apoyo financiero para la investigación, autoría y/o publicación de este artículo. Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Investigación de Corea (NRF) financiada por el Ministerio de Educación (MISIT) (NRF-2020R1F1A1074360). Este trabajo fue apoyado por la Beca de Investigación de la Universidad de Kwangwoon en 2023.

Conflicto de intereses

Los autores declaran que la investigación se llevó a cabo en ausencia de relaciones comerciales o financieras que pudieran interpretarse como un posible conflicto de intereses.

Nota del editor

Todas las afirmaciones expresadas en este artículo son únicamente las de los autores y no representan necesariamente las de sus organizaciones afiliadas, ni las del editor, los editores y los revisores. Cualquier producto que pueda ser evaluado en este artículo, o afirmación que pueda ser hecha por su fabricante, no está garantizado ni respaldado por el editor.

Material complementario

El material complementario para este artículo se puede encontrar en línea en: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fvets.2024.1298467/full#supplementary-material

Referencias