Resumen

Introducción:

Las variantes de pequeñas colonias de Staphylococcus aureus (SCVs) representan un fenotipo adaptado a la persistencia vinculado a la mastitis bovina crónica y recurrente. El receptor de interleucina-10 ⍺ (IL10RA) es un regulador central de la señalización antiinflamatoria en la glándula mamaria, pero su papel en la configuración de las respuestas transcripcionales al desafío intracelular estafilocócico no ha sido caracterizado.

Métodos:

Las células epiteliales mamarias bovinas (MECs) generadas por CRISPR/Cas9 y IL10RA, junto con controles de tipo salvaje (WT), fueron infectadas con la cepa de S. aureus SCV Heba3231 o con su cepa parental isogénica (PS). Las respuestas transcripcionales se perfilaron mediante secuenciación de ARN y se compararon entre genotipos y condiciones de infección.

Resultados:

Las células WT presentaron respuestas marcadamente divergentes a la infección por PS (8 DEGs) frente a la infección por SCV (461 DEGs), sin solapamiento entre los dos conjuntos génicos, lo que indica el compromiso específico de la cepa con programas moleculares distintos. La infección por SCV en células WT aumentó las vías biosintéticas lipídicas y esteroles mientras suprimía los genes de integridad de la barrera epitelial (S100A8, S100A9, TGM3, KRTDAP). La alteración de IL10RA amplificó sustancialmente la desregulación transcripcional: las células IL10RA-KO infectadas con PS produjeron 619 DEGs (un aumento de 77,4 veces respecto al WT-PS), mientras que las células IL10RA-KO infectadas con SCV produjeron 1.297 DEGs (un aumento de 2,8 veces respecto al WT-SCV). Aproximadamente entre el 32 y el 36% de los genes regulados por IL10RA formaron un núcleo compartido entre las condiciones de infección. La pérdida de IL10RA reprimió las vías de citocinas proinflamatorias (TNF, IL-17), mejoró los programas proapoptóticos durante la infección por SCV y suprimió la maduración fagosomal y los programas de genes metabólicos lipídicos. Se identificaron genes candidatos a IL10RA, incluyendo CD79B, WFDC2, AMN y LY6E, como objetivos para una validación posterior.

Discusión:

Estos hallazgos establecen a IL10RA como un regulador amplio de la homeostasis transcripcional en los MECs bovinos durante la infección estafilocócica, con efectos desproporcionados en programas génicos inflamatorios y relacionados con barreras bajo el desafío de los SCV. Los genes candidatos identificados merecen validación en células mamarias bovinas primarias, células somáticas de leche o muestras clínicas de mastitis para confirmar su relevancia en la patogénesis crónica y recurrente de enfermedades.

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