Resumen

Objetivo:

Este estudio investigó cambios en la metilación del promotor ESR2 y su asociación con la expresión génica en los ovarios de oveja de Duolang durante el inicio de la pubertad.

Métodos:

Se recogieron tejidos ováricos de 15 ovejas Duolang sanas asignadas a los grupos prepubertal, pubertal y postpuberal temprano (n = 5 por grupo). Los niveles de metilación de dos islas CpG en el promotor ESR2 y la expresión de ARNm ESR2 se determinaron mediante secuenciación de bisulfitos y PCR cuantitativa, respectivamente. El efecto del agente desmetilante global 5-Aza-dC sobre la expresión de ESR2 se evaluó en células de granulosa ovárica tratadas con 0,5 μM 5-Aza-dC, con tres réplicas por tratamiento.

Resultados:

El nivel de metilación de la isla 1 de CpG disminuyó del 82,22% en el grupo prepuberal al 78,71% y 71,11% en los grupos pubertal y postpuberal, respectivamente. La metilación de la isla 2 de CpG disminuyó inicialmente y posteriormente aumentó, con un nivel significativamente menor en el grupo pubertal que en los grupos prepuberal y postpuberal (P < 0,05). La expresión de ARNm ESR2 fue significativamente mayor en el grupo pubertal que en el grupo prepuberal (P < 0,05), mientras que el grupo pospuberal mostró una expresión significativamente mayor que tanto el grupo prepubérico como el pubertal (P < 0,01). La metilación de la isla 1 de CpG se correlacionó negativamente significativamente con la expresión de ESR2 en los grupos pubertal y postpuberal (P < 0,05). En comparación con el control DMSO, el tratamiento con 0,5 μM 5-Aza-dC durante 36 horas aumentó significativamente la expresión de ARNm ESR2 en células de granulosa (P < 0,01).