1 Introducción

El oído es uno de los 5 sentidos básicos en ambas especies, humanos y perros. La audición es esencial para la interacción social, la orientación y la prevención de riesgos (1, 2). La pérdida auditiva y la sordera suelen ser el resultado de la pérdida auditiva periférica, que puede dividirse en varias categorías: (A) hereditaria o adquirida, (B) congénita o de aparición tardía, y (C) pérdida auditiva neurosensorial o conductiva (3). «Las formas más comúnmente observadas en los perros son neurosensoriales congénitas hereditarias, neurosensoriales adquiridas de inicio tardío (p. ej., ototoxicidad, inducidas por ruido, presbiacusia) y conductivas adquiridas de inicio tardío (p. ej., otitis externa/media)» (3).

Durante mucho tiempo, solo existían pruebas de comportamiento para evaluar la audición en perros (4, 5). La situación cambió con el nacimiento de un método de prueba electrodiagnóstica a finales de la década de 1970 (6, 7). La respuesta auditiva del tronco encefálico (ABR), o respuesta auditiva evocada del tronco encefálico, se ha convertido en la prueba auditiva más utilizada en las últimas décadas. Entre las muchas ventajas de las pruebas auditivas con ABR se encuentran la objetividad, la simplicidad, la seguridad, la confiabilidad, la sensibilidad y la rentabilidad (6, 7). Además, ABR puede evaluar de forma independiente la audición de cada oído. Hasta el día de hoy, ABR es el estándar de oro para el cribado auditivo objetivo y cuantitativo en humanos recién nacidos (8) y perros (9). Ejemplos de uso de ABR en la práctica veterinaria incluyen pruebas de audición en cachorros para detectar sordera neurosensorial congénita unilateral o bilateral (3, 6, 10-12), en perros ancianos para pérdida auditiva relacionada con la edad (13-15) o en perros con otitis (16-19). Además, la ABR también se ha utilizado en neurología veterinaria para examinar la función del tronco encefálico (6, 20-22), ya que las latencias y amplitudes de los picos posteriores reflejan la conducción dentro de la vía auditiva del tronco encefálico y, por último, también para la confirmación de la muerte encefálica (20, 22).

En 2011, Wilson et al. (6, 7) ya señalaron que el ABR convencional es limitado en su uso en medicina veterinaria debido a los tiempos de prueba relativamente largos. Los autores señalaron que un cribado auditivo básico, en el que sólo se puede registrar una única forma de onda ABR para cada oído a altas intensidades de estimulación, lleva unos minutos. Por el contrario, una evaluación más completa del diagnóstico y del umbral de audición, en la que se pueden registrar docenas de formas de onda ABR para cada oído, podría durar mucho más tiempo (6, 7). La evaluación del umbral auditivo requiere pruebas repetidas a intensidades de estímulo decrecientes. El umbral de audición se correlaciona con la desaparición del pico V a bajas intensidades de estímulo.

Ha habido intentos de acelerar los tiempos de examen para el cribado auditivo en recién nacidos con metodologías avanzadas de estimulación y detección, por ejemplo, nuevos modos de estimulación binaural y algoritmos para la detección automatizada de picos (23). Solo unos pocos estudios describieron la ABR después de la estimulación binaural en perros (24-26). Sin embargo, estos examinadores registraron una forma de onda ABR para ambos oídos y, por lo tanto, no pudieron obtener grabaciones independientes para el oído izquierdo y derecho. En el pasado y especialmente en la actualidad, cada vez son más los autores que utilizan tasas de estímulo más altas en animales (7, 9, 11, 27). Este enfoque también puede acortar los tiempos de prueba mientras se mantiene la calidad de la prueba (7). Además, un tipo de estímulo relativamente nuevo, llamado «chirrido», está en aumento en la medicina humana (23). El estímulo chirrido es conocido por compensar la dispersión de la membrana basilar y conducir a una estimulación sincrónica de las células ciliadas externas e internas en la cóclea (28-31). Por lo tanto, los chirridos sincronizan la excitación de las fibras nerviosas auditivas a lo largo de la espiral coclear. Por el contrario, los estímulos de clic convencionales inician respuestas sincronizadas principalmente a partir de las fibras del nervio auditivo basal. Por lo tanto, los estímulos de chirrido dan como resultado una respuesta evocada más alta, lo que se refleja en amplitudes más altas del ABR, especialmente en la amplitud del pico V y en una mejor relación señal-ruido (28-31). Hasta ahora, solo hay unos pocos informes sobre estímulos de chirridos en animales, por ejemplo, ratas (32), lechuzas comunes (33) y un estudio en perros (34).

El objetivo de este estudio fue acelerar la evaluación del umbral auditivo en perros utilizando nuevos métodos ABR de próxima generación.

2 Materiales, equipos y métodos

Los estudios en animales fueron aprobados por el comité de ética de la facultad de veterinaria de la LMU Múnich (AZ 333-20-09-2022). Los estudios se llevaron a cabo de acuerdo con la legislación local y los requisitos institucionales. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de los propietarios para la participación de sus animales en este estudio.

2.1 Diseño del estudio

Se recopilaron datos de ABR de 90 perros propiedad de clientes entre 08-2021 y 08-2023 con un módulo de detección de recién nacidos ABR de próxima generación en perros sedados o anestesiados de forma rutinaria. Los perros se presentaron específicamente para las pruebas de audición o las pruebas de audición formaron parte de la evaluación diagnóstica. Alternativamente, se ofreció al dueño del perro como una prueba adicional junto con otros procedimientos de diagnóstico en anestesia. Todos los pacientes propietarios fueron informados sobre la prueba de audición y dieron su consentimiento para que se realizara la prueba de audición. Durante el estudio, se introdujeron modificaciones consecutivas del protocolo de prueba ABR estándar para acortar el tiempo de prueba (fase de optimización). Se evaluó el impacto de las modificaciones en la morfología de la forma de onda, el tiempo de prueba y el umbral de audición. Posteriormente, se investigó la relación entre el umbral de audición medido y los parámetros clínicos, por ejemplo, la puntuación de audición, la puntuación de otitis o la edad (fase clínica).

2.2 Sedación o anestesia

Los exámenes ABR se realizaron de forma rutinaria en perros sedados (27 perros) o anestesiados (60 perros). Tres perros fueron evaluados para la confirmación de muerte encefálica. El protocolo de rutina para la sedación fue butorfanol y dexmedetomidina administrados por vía intravenosa o intravenosa. El protocolo de rutina para la anestesia general fue la inducción de propofol por vía intravenosa y el mantenimiento con inhalación de sevoflurano o isoflurano.

2.3 Equipamiento

Todas las mediciones se realizaron con el dispositivo móvil Cubaudio (Nº de artículo 100360-CUB), auriculares de inserción y el software de evaluación MIRA (Archivo Complementario S1). El dispositivo es fabricado por Path Medical GmbH, Germering, Alemania y distribuido para uso veterinario por el Dr. Ing. Hans Oswald Ingenieurdienstleistungen, Oberpframmern, Alemania, info@oexing.de de acuerdo con la normativa vigente de la UE (Archivo Complementario S2). Los ABR se registraron mediante electrodos de aguja subdérmicos de acero inoxidable (12 × 0,40 mm; Natus Europe GmbH, Planegg, Alemania).

2.4 Ajustes

2.4.1 Colocación de electrodos

En el modo de prueba monoaural, los electrodos subdérmicos se colocaron de la siguiente manera: electrodo inversor (−) debajo del trago de la oreja medida (oreja izquierda o derecha), electrodo no inversor (+) en el vértice y electrodo de tierra en el cuello. En los modos de prueba binaurales, el electrodo inversor (−) siempre se colocó debajo del trago del oído derecho (Figura 1). Por lo tanto, en el modo de prueba binaural, el ABR del oído derecho se registró ipsilateral y el ABR del oído izquierdo se registró contralateral.

Figura 1. Evaluación del umbral de audición ABR (modo de prueba binaural). Los auriculares de inserción roja y azul se colocaron en el canal auditivo externo derecho e izquierdo, respectivamente. Colocación de electrodos: electrodo inversor (rojo) debajo del trago de la oreja derecha, electrodo no inversor (verde) en el vértice y electrodo de tierra (negro) en el cuello.

2.4.2 Estímulos

Los estímulos de clic o chirrido (banda ancha, polaridad alterna, duración 0,1 ms) se presentaron a través de auriculares insertables con una disminución gradual de la intensidad del estímulo a partir de 80 dBnHL para cada protocolo ABR. Se registró el ABR para cada intensidad de estímulo. Se promedió 1.000 estímulos por intensidad (80, 60, 40, 30, 20, 10, 0 y −10 dBnHL) y, en consecuencia, menos estímulos cuando se activó la detección automática del pico V. El filtro de paso alto se preajustó a 80 Hz y el umbral del artefacto se preestableció a 5 μV. El ruido de enmascaramiento a 30 dBnHL por debajo de la intensidad de estimulación se aplicó al oído no probado en el modo de prueba monoaural. No se aplicó ruido de enmascaramiento en los modos de prueba binaurales.

2.4.3 Umbral de audición

El umbral auditivo se definió como la intensidad de estimulación más baja con un pico V identificable, como se describió previamente en medicina veterinaria (35-37). Los perros sin un pico de V registrable a 80 dBnHl se consideraron sordos y se observaron con un umbral auditivo de 90 dBnHL.

2.4.4 Protocolos ABR

El ABR se registró durante 15 milisegundos después de cada estímulo. Se promediaron de forma rutinaria mil respuestas para cada intensidad de estimulación, a menos que se activara la detección automática de picos. Los umbrales de audición de ABR se evaluaron con tres modificaciones diferentes del protocolo ABR monoaural convencional. Los protocolos ABR difirieron según el tipo de estímulo (clic o chirrido de banda ancha), la frecuencia a la que se presentó el estímulo (11 Hz, 30 Hz y 90 Hz) y el modo de estimulación (monoaural o binaural). El modo de estimulación también reflejaba el modo de grabación. El modo de prueba monoaural solo registró un ABR para un oído y el modo de prueba binaural registró dos ABR individuales para ambos oídos simultáneamente. Los resultados se mostraron con diferentes colores, es decir, rojo, oreja derecha; azul, oreja izquierda.

2.5 Fase de optimización

Los puntos de comparación fueron el tiempo de prueba y la morfología del ABR para cada protocolo. Durante el estudio se introdujeron protocolos ABR modificados de forma escalonada: parte 1: inicialmente, medimos los umbrales de audición utilizando el protocolo monoaural de clic de 11 Hz (8 perros), seguido del protocolo binaural de clic de 11 Hz (6 perros). Posteriormente, se aplicaron mayores tasas de estimulación con el protocolo binaural de clic de 30 Hz (43 perros). Parte 2: introdujimos el protocolo binaural chirp de 90 Hz con un estímulo de chirrido de banda ancha y tasas aún más altas de presentación de estímulos (90 Hz) (42 perros). Parte 3: exploramos la opción de llevar a cabo pruebas ABR con una detección automática de pico V con el protocolo binaural de clic de 30 Hz (35 perros) y el protocolo binaural de chirrido de 90 Hz (33 perros). El algoritmo fue diseñado para detectar el pico V del ABR canino. Cuando el algoritmo reconocía una respuesta electrofisiológica, por ejemplo, el pico V en la latencia esperada, con una certeza suficientemente alta basada en la relación señal-ruido, cambiaba automáticamente a la siguiente intensidad de estimulación más baja. Por lo tanto, se necesitaron menos repeticiones a intensidades de estimulación más altas en perros con audición normal. El algoritmo para la detección automática del pico V se ajustó repetidamente al ABR canino durante el estudio.

2.6 Fase clínica

Se obtuvieron puntuaciones de otitis externa (38) y puntuaciones de audición (18) en 80 perros antes de la prueba ABR. Sobre la base de un examen otoscópico, se evaluó la presencia de otitis externa en cada oído (grado 0-12). La puntuación auditiva se obtuvo con un cuestionario previamente validado, respondido por el propietario (grado 0-8). La puntuación auditiva que proporcionó el dueño del perro se utilizó para ambos oídos. Las puntuaciones de otitis externa ≥4 indicaron la presencia de otitis externa. Las puntuaciones auditivas ≥2 reflejaban una presunta pérdida auditiva por parte del propietario. Los umbrales de audición se midieron con el protocolo binaural de clic de 30 Hz. Los oídos sin un pico V registrable a 80 dBnHL se consideraron sordos y se observaron con un umbral auditivo de 90 dBnHL.

2.7 Comparación de los umbrales de audición y la fiabilidad interobservador

Se compararon los umbrales de audición entre los dos protocolos ABR, el protocolo binaural de clic de 30 Hz y el protocolo binaural de chirp de 90 Hz (80 oídos).

La fiabilidad interobservador se evaluó entre dos evaluadores independientes. Dos observadores ciegos (AS y GB) evaluaron de forma independiente las grabaciones ABR de 22 oídos y anotaron los respectivos umbrales de audición.

2.8 Evaluación estadística

Los tiempos medios de prueba y los intervalos de confianza de diferentes protocolos de ABR se compararon mediante ANOVA de Welch. Las pruebas post-hoc de Games-Howell compararon los tiempos medios de prueba por pares para los diferentes protocolos. Los tiempos de prueba y los umbrales de audición del protocolo binaural de clic de 30 Hz y el protocolo binaural de chirrido de 90 Hz se compararon con modelos lineales de efectos mixtos. En estos modelos, se proporcionaron valores medios marginales estimados e intervalos de confianza. La fiabilidad interobservador entre dos evaluadores independientes se evaluó mediante la tau de Kendall. El punto de comparación fue el umbral de audición observado. El análisis de correlación Tau de Kendall indicó el grado de correlación: sin correlación (R = 0,0 < 0,1), correlación baja (R = 0,1 < 0,3), correlación media (R = 0,3 < 0,5), correlación alta (R = 0,5 < 0,7) y correlación muy alta (R = 0,7 < 1). Se exploró el impacto de una puntuación de audición elevada, una puntuación de otitis o la edad en los umbrales de audición con una prueba de Kruskal-Wallis y pruebas post-hoc de Dunn Bonferroni. P < 0,05 se consideró significativo y el nivel de confianza fue del 95% para todas las pruebas. Los valores de p se ajustaron para comparaciones múltiples mediante el método de Holm. Los datos brutos se analizaron descriptivamente en Microsoft Excel 2023 (Versión 16.74, Microsoft Corporation, Redmond, WA, Estados Unidos). Los análisis estadísticos se llevaron a cabo en el software estadístico R 2023 (versión 4.3.1, The R Foundation for Statistical Computing, Viena, Austria) y en DATAtab Team 2023 (DATAtab: Online Statistics Calculator, DATAtab e.U. Graz, Austria).

3 Resultados

Noventa perros (56 machos, 34 hembras, edad media de 4,3 años, rango de 8 semanas a 15,2 años) y 175 oídos participaron en las pruebas de audición. Las tres razas más comunes fueron los perros mestizos (n = 16), los labradores retriever (n = 8) y los perros ganaderos australianos (n = 8). Cuarenta y nueve perros se presentaron por enfermedad neurológica, 27 perros por cribado auditivo, 3 perros por enfermedad del oído, 3 perros por la evaluación de la muerte encefálica y 8 perros por otros motivos. Los ABR se registraron en 153 oídos y estuvieron ausentes en 22 oídos.

3.1 Fase de optimización, parte 1: introducción del modo de prueba binaural y tasas de estímulo más rápidas

3.1.1 Protocolo monoaural de clic de 11 Hz (protocolo de referencia) frente a protocolo binaural de clic de 11 Hz

El primer punto de optimización fue la introducción de la técnica binaural que permite grabaciones simultáneas e independientes desde ambos oídos. El algoritmo mostraba las grabaciones ABR del oído derecho e izquierdo como formas de onda separadas que se distinguían por color: rojo (oído derecho), azul (oído izquierdo). El protocolo monoaural convencional de clic de 11 Hz, que estimulaba y registraba cada oído por separado, se comparó con el protocolo binaural de clic de 11 Hz.

3.1.1.1 Morfología de ABR

No hubo diferencias visibles en la morfología de la ABR de la oreja derecha e izquierda cuando se probó con el protocolo monoaural (Figura 2A). Por el contrario, la ABR del oído izquierdo mostró menores amplitudes de pico I, II y III con el protocolo binaural (Figura 2B). La identificación de los picos más tempranos del ABR fue más difícil con el modo binaural porque los picos anteriores I, II y III se vieron desde un sitio contralateral distante, mientras que el pico V todavía se identificó fácilmente por su alta amplitud y su posterior valle. La diferencia en la apariencia de la ABR entre el oído derecho y el izquierdo reflejó que la ABR de la oreja derecha se registró con un montaje ipsilateral (la oreja estimulada estaba cerca del electrodo inversor), mientras que la ABR de la oreja izquierda se registró con un montaje contralateral (la oreja estimulada estaba lejos del electrodo inversor) cuando se aplicó el modo de prueba binaural, Pruebas en ambos oídos simultáneamente.

Figura 2. Formas de onda ABR con diferentes protocolos de prueba (rojo, oído derecho; azul, oído izquierdo). (A) Haga clic en monoaural de 11 Hz. (B) Haga clic en binaural de 11 Hz. (C) Haga clic en binaural de 30 Hz. Cada forma de onda ABR representa la respuesta promedio de 1.000 repeticiones a 80 dBnHL. (A) Modo de prueba monoaural: la posición del electrodo de registro negativo estaba debajo del trago de la oreja derecha cuando se probó la oreja derecha y debajo del trago de la oreja izquierda cuando se probó la oreja izquierda. El ruido blanco se presentó en el oído contralateral. Las formas de onda ABR exhiben una disparidad mínima entre el oído derecho y el izquierdo. (B,C) Modo de prueba binaural: el electrodo de registro negativo siempre se colocó debajo del trago de la oreja derecha. El modo de prueba binaural registró respuestas ABR independientes del oído derecho e izquierdo simultáneamente. El ABR contralateral, registrado desde el oído izquierdo (azul) destaca por su clara aparición de picos V, mientras que los picos precedentes aparecen con amplitudes reducidas.

3.1.1.2 Tiempo de ensayo

La opción de realizar pruebas binaurales dio lugar a una reducción significativa de los tiempos de prueba (p = 7,22 × 10⁻⁸) (Figura 3). La medición de los umbrales de audición con un protocolo monoaural de 11 Hz (80, 60, 40, 30, 20, 10, 0, −10 dBnHL) duró 12,85 min (media) para cada oído y 25,7 min para ambos oídos (media, IC del 95% 24,7-26,6 min) cuando se utilizó un promedio estandarizado (1.000×) para cada intensidad de estímulo probada. El protocolo binaural equivalente (clic binaural de 11 Hz) ahorró aproximadamente la mitad del tiempo de prueba, con un tiempo medio de prueba de 12,7 min para ambos oídos (IC del 95%: 12,4-12,9 min). Tampoco hubo necesidad de reposicionar los electrodos con el modo de prueba binaural, lo que ahorró manipulaciones adicionales y tiempo de prueba.

Figura 3. Reducción del tiempo de prueba con diferentes protocolos de prueba ABR. Las barras grises representan el tiempo medio de la prueba para medir los umbrales de audición en ambos oídos. El tiempo de prueba disminuyó significativamente con la introducción de nuevos protocolos de 25,7 min a 1,11 min (media, p = 1,16 × 10⁻³⁶; ANOVA de Welch). Punto negro: valores medios; líneas horizontales: intervalos de confianza (IC) del 95%. Clic monoaural de 11 Hz (n = 8): 25,7 min, IC del 95%: 24,7–26,6; clic binaural de 11 Hz (n = 6): 12,7 min, IC del 95%: 12,4–12,9; clic binaural de 30 Hz (n = 43): 4,89 min, IC del 95%: 4,66–5,12; binaural de clic de 30 Hz incl. detección automática de pico V (n = 35): 2,75 min, IC del 95%: 2,38–3,11; chirrido binaural de 90 Hz (n = 42): 1,67 min, IC del 95%: 1,66–1,68; chirrido binaural de 90 Hz incl. detección automática de pico V (n = 33): 1,11 min, IC del 95%: 0,98-1,24.

3.1.2 Protocolo binaural de clic de 11 Hz frente a protocolo binaural de clic de 30 Hz

El siguiente punto de optimización fue la introducción de mayores tasas de estímulo.

3.1.2.1 Morfología de ABR

No hubo diferencias visibles en la morfología de las formas de onda ABR cuando la tasa de estímulo se incrementó de 11 Hz a 30 Hz (Figuras 2B,C).

3.1.2.2 Tiempo de ensayo

El ahorro de tiempo del protocolo binaural de clic de 30 Hz fue inmenso. El protocolo binaural de clic de 30 Hz requirió 4,89 min (media, IC del 95%: 4,66-5,12 min) para la evaluación del umbral de audición en ambos oídos y ahorró más de la mitad del tiempo de la prueba (p = 4,28 × 10⁻¹³; Figura 3).

3.2 Fase de optimización, parte 2: introducción de un nuevo estímulo chirrido con una tasa de estímulo de 90 Hz

3.2.1 Protocolo binaural de clic de 30 Hz frente a protocolo binaural chirp de 90 Hz

Esta parte introdujo el nuevo estímulo chirrido con una tasa de estímulo aún mayor de 90 Hz. Los puntos de comparación incluyeron la morfología, el tiempo de prueba y el umbral de audición.

3.2.1.1 Morfología de ABR

Las formas de onda del ABR registradas con un chirrido de 90 Hz difieren notablemente de las formas de onda del ABR registradas con un estímulo de clic de 30 Hz. Usando el chirrido de 90 Hz, el ABR de la oreja derecha (rojo) mostró dos picos identificables antes del valle característico después del pico V, mientras que el ABR de la oreja izquierda (azul) mostró solo un pico impresionante antes del valle. Por el contrario, los picos anteriores eran más fáciles de identificar con el protocolo binaural de clic de 30 Hz. La forma de onda ABR del chirrido sugirió la optimización principalmente para el pico V con su valle siguiente, mientras que los picos anteriores se visualizaron de forma limitada (Figura 4).

Figura 4. Evaluación del umbral auditivo ABR con el protocolo binaural chirp de 90 Hz. La figura muestra múltiples formas de onda ABR generadas a diferentes intensidades de estimulación (tiempo medio de prueba 100 s; umbral de audición en ambos oídos 10 dBnHL). Las formas de onda ABR ipsilateral (rojo, oído derecho) y contralateral (azul, oído izquierdo) se centraron en el pico V y en el valle posterior. Los picos precedentes son menos visibles en el ABR contralateral registrado (azul, oído izquierdo).

3.2.1.2 Tiempo de ensayo

El tiempo de prueba para medir los umbrales de audición en ambos oídos disminuyó de 4,89 min (media, IC del 95%: 4,66-5,12) con el protocolo de clic de 30 Hz a 1,67 min (media, IC del 95%: 1,66-1,68) con el protocolo de chirp de 90 Hz (p = 1,20 × 10⁻¹¹) (Figura 3).

3.2.1.3 Umbrales de audición

Se compararon los umbrales de audición en 80 oídos. El 72,5% (58/80) no difirieron, el 22,5% (18/80) difirieron en 10 dBnHL y el 5% (4/80) difirieron en 20 dBnHL. El umbral de audición medio marginal estimado calculado mediante modelos lineales de efectos mixtos fue de 19 dBnHL (IC del 95%: 13-24 dBnHL) para el protocolo binaural de clic de 30 Hz, y de 20 dBnHL (IC del 95%: 14-25 dBnHL) para el protocolo binaural chirp de 90 Hz.

3.3 Fase de optimización, parte 3: exploración de la detección automática de picos V

3.3.1 Haga clic en el protocolo binaural de 30 Hz y chirriar en el protocolo binaural de 90 Hz con detección automática de pico V

Esta fase de prueba exploró la funcionalidad adicional de un algoritmo recientemente desarrollado para la detección automática de picos V en el ABR canino.

3.3.1.1 Tiempo de ensayo

El algoritmo para la detección automática del pico V logró un ahorro de tiempo adicional. El tiempo de prueba para la evaluación de los umbrales de audición en ambos oídos disminuyó a 2,75 min (media, IC del 95%: 2,38-3,11 min) con el protocolo binaural de clic de 30 Hz y a 1,11 min (media, IC del 95%: 0,98-1,24 min) con el protocolo binaural chirp de 90 Hz (Figura 3).

3.4 Fiabilidad interobservador

La fiabilidad interobservador fue excelente. Dos evaluadores independientes determinaron 22 umbrales de audición para 11 perros. Los observadores coincidieron en 21 de los 22 umbrales de audiencia (95,5%; R = 1; p = 0,018).

3.5 Fase clínica: relación entre los umbrales de audición de la ABR y la puntuación de audición, la puntuación de otitis o la edad (80 perros, 160 oídos)

En la Tabla 1 se muestra la relación entre la puntuación auditiva, la puntuación de otitis o edad y los umbrales auditivos ABR. La puntuación de audición fue elevada en 40 oídos (20 perros, ≥2) y la puntuación de otitis fue elevada en 25 oídos (≥4). Los oídos con pérdida auditiva reportados por el dueño del perro (media 68 dBnHL), o los oídos con otitis externa (media 65 dBnHL) mostraron umbrales de audición más altos que los oídos normales (media 15 dBnHL, p < 0,001). En la figura 5 se muestra la ABR de un perro con otitis externa y media en el oído derecho debido a un colesteatoma. El ABR muestra un aumento del umbral de audición en el oído derecho (60 dBnHL). Los perros ancianos (>10 años: media de 58 dBnHL) mostraron umbrales de audición más altos que los perros más jóvenes (<5 años: media de 26 dBnHL, p < 0,001; 5-10 años: media de 26 dBnHL, p = 0,001). Los resultados muestran que las deficiencias clínicas y la edad avanzada contribuyen a un umbral auditivo elevado.

Tabla 1. Relación entre los umbrales auditivos ABR y la puntuación auditiva, la puntuación de otitis o la edad (80 perros, 160 oídos).

Figura 5. Evaluación del umbral auditivo ABR (chirrido binaural de 90 Hz) en un perro con otitis externa y media en el oído derecho debido a un colesteatoma. La oreja izquierda no se vio afectada. Oído derecho (rojo): umbral de audición 60 dBnHL. Oído izquierdo (azul): umbral de audición 20 dBnHL.

3.6 Muerte encefálica

Utilizando el ABR como herramienta diagnóstica, 3 perros en estado de coma fueron diagnosticados con muerte encefálica. Los motivos de muerte encefálica fueron: masa intracraneal con hemorragia intracraneal aguda, incidencia anestésica y complicación postoperatoria después de la cirugía. En la figura 6 se muestran los ABR de un perro, que falleció en la fase postoperatoria tras la cirugía de un absceso retrobulbar.

Figura 6. ABRs (clic binaural de 11 Hz) antes y después de un paro respiratorio en un perro, que falleció en la fase postoperatoria tras la cirugía de un absceso retrobulbar. (A) ABR antes de la cirugía: normal. (B) ABR después de un paro respiratorio (el perro fue ventilado): ausente, compatible con muerte encefálica.

4 Discusión

Este estudio estableció un protocolo de cribado auditivo súper rápido con un estímulo de chirrido de 90 Hz y un modo de prueba binaural. Los umbrales de audición de ambos oídos se pueden obtener en 1-2 minutos sin necesidad de reposicionar los electrodos. En conjunto, este nuevo protocolo de prueba allanó el camino para la aplicación rutinaria de las mediciones del umbral auditivo en la práctica veterinaria, especialmente para perros con sospecha de enfermedades del oído.

El estudio exploró las modificaciones de diferentes protocolos ABR para la evaluación del umbral auditivo en perros. Los puntos de investigación fueron el tiempo de prueba, la calidad de la prueba y la correlación clínica. Los resultados demostraron que los protocolos ABR modificados son rápidos y fiables en la evaluación de los umbrales de audición.

4.1 Estimulación/grabación binaural (modo de prueba binaural)

El modo de prueba binaural ahorró aproximadamente la mitad del tiempo de prueba para la evaluación del umbral de audición para ambos oídos. Con este modo, los umbrales de audición de ambos oídos se pueden medir en un ciclo de medición. Los modos de prueba monoaural requieren dos ciclos de medición, ya que cada oído se prueba por separado. Además, el modo de prueba monoaural convencional pierde tiempo adicional para reposicionar el electrodo de registro e iniciar la segunda medición. El ABR del «electrodo lejano» contralateral apareció ligeramente diferente del ABR del «electrodo cerca del oído» ipsilateral en el modo de prueba binaural. Las amplitudes de los picos I-III fueron notablemente menores y la identificación de estos picos fue más difícil en los registros contralaterales. Por el contrario, el pico V siempre fue fácil de identificar debido a su origen más central, su gran amplitud y su posterior vaguada. El modo de prueba binaural resulta suficiente para la evaluación del umbral de audición debido a la buena visualización del pico V. Por el contrario, se debe preferir el modo de prueba monoaural cuando el ABR se utiliza como herramienta diagnóstica para la evaluación de las funciones neurológicas, es decir, la evaluación de la conducción del tronco encefálico dentro de la vía auditiva central. En tales casos, el análisis requiere mediciones precisas de las latencias máximas e interpico para cada oído (20, 21).

Anteriormente, otros autores ya habían informado sobre la estimulación binaural en perros (24-26). Sin embargo, estos estudios mostraron la ABR de ambos oídos como una sola forma de onda después de la estimulación binaural y no proporcionaron trazas únicas para cada oído. Por el contrario, el Cubaudio utiliza protocolos y algoritmos de prueba avanzados que permiten el registro simultáneo de trazas independientes para cada oído. En 2018, Andre Lodwig (Path Medical GmbH, Germering, Alemania) explicó la funcionalidad del modo de prueba binaural en el sitio web de la empresa (39). Lodwig enfatizó que no se permitió correlacionar las tasas de estímulo, presentadas a ambos oídos, en el modo de prueba binaural. Dio el siguiente ejemplo: «Un esquema de grabación tradicional consiste en aplicar tasas de estímulo diferentes pero constantes a ambos oídos, como 37 Hz y 41 Hz. Incluso las opciones preferibles serían las tasas de estímulo que no tienen un período común (1 Hz en el ejemplo anterior), como 37,3816394 Hz y 41,136818273 Hz, etc. Espectralmente, cualquier respuesta neuronal que sea evocada por cualquiera de los estímulos contiene solo la tasa de estímulo y los múltiplos. Esto significa que, si el promedio se realiza en sincronía con la tasa de estímulo de cada oído, las respuestas se pueden registrar de forma independiente. La señal potencial auditiva evocada que se evoca desde cada oído aparece como un ruido EEG añadido muy pequeño, ya que no está correlacionado con el promedio» (39). Incluso es posible modificar la tasa de estímulo durante la prueba para lograr tasas de estímulo promedio casi iguales para ambos oídos. Se espera que este modo mejore la robustez frente a artefactos (39). La estimulación y grabación binaural se utiliza en audiología humana con pruebas ASSR de próxima generación que evalúan varios umbrales de audición para varias frecuencias de prueba simultáneamente para ambos oídos (23). Hay otros estudios en medicina humana que informan sobre la estimulación binaural y el registro binaural (40-42). Sin embargo, el objetivo de estos estudios no fue evaluar los resultados individuales de la ABR para el oído derecho e izquierdo simultáneamente. En cambio, los autores investigaron la influencia de la estimulación binaural, que es el componente de interacción binaural, en la medición general (40-42).

4.2 Mayores tasas de estimulación

Las tasas de estimulación más altas podrían reducir enormemente el tiempo de prueba requerido para la evaluación del umbral auditivo de ABR. En el pasado, algunos autores ya aplicaban tasas de estimulación más altas en perros (7, 9, 11). En 2011, Wilson et al. (7) informaron que la calidad de las formas de onda ABR de clic podía mantenerse en perros sedados cuando la tasa de estímulo se incrementaba de 11 Hz a 33 Hz o incluso a 91 Hz. Nuestros resultados se alinean con las observaciones de Wilsons. Incluso, para las grabaciones binaurales, no apreciamos ninguna diferencia perceptible en la morfología de las formas de onda ABR al aumentar la tasa de estímulo de 11 Hz a 30 Hz. Un inconveniente del presente estudio es que no investigamos los clics presentados con tasas de estimulación tan altas como 90 Hz.

4.3 Nuevo estímulo «chirrido»

El estímulo chirrido puede compensar la dispersión de la membrana basilar, lo que conduce a la estimulación sincrónica de las células ciliadas de la cóclea. Esta sincronización da como resultado potenciales de acción compuestos más altos y amplitudes más altas de la respuesta evocada, especialmente en la amplitud del pico V (28-31). En consecuencia, las formas de onda son más fáciles de detectar y el tiempo de prueba puede reducirse (30). En medicina humana, el estímulo chirp se utiliza actualmente principalmente en mediciones de frecuencia específica, como las respuestas auditivas de estado estacionario (ASSR) o las ABR de frecuencia específica, reemplazando a los pips de tono o ráfagas de tono de frecuencia específica tradicionales (43-47). En 2020, Eder et al. (46) resumieron varios estudios de la siguiente manera: «Un chirrido es más eficiente que un clic correspondiente en el registro del ABR y de las respuestas auditivas en estado estacionario (ASSR)». En nuestras grabaciones en perros, se hizo evidente que el estímulo del chirrido estaba optimizado para la evaluación del umbral de audición. El pico V siempre tuvo una gran amplitud, mientras que los picos anteriores no se identificaron de forma fiable. Por lo tanto, el estímulo chirp no se recomienda para la investigación de latencias máximas e interpico. En 80 oídos, en los que los umbrales de audición se midieron mediante un clic y un estímulo de chirrido, el umbral de audición medio marginal estimado del protocolo binaural de chirrido de 90 Hz difería solo en 1 dB del protocolo binaural de clic de 30 Hz. Dado que las evaluaciones del umbral auditivo generalmente se realizan en pasos de 10 dBnHL, esta desviación marginal puede considerarse insignificante. Además, los umbrales de audición fueron idénticos en el 72,5% y difirieron en solo 10 dBnHL en el 22,5%. Los umbrales de audición obtenidos con los estímulos tradicionales y los estímulos chirridos también parecen estar altamente correlacionados en humanos (23). El ahorro de tiempo adicional y el hecho de que la evaluación del umbral de audición fuera posible en 1-2 minutos para ambos oídos simultáneamente, respaldan firmemente el uso del protocolo de detección auditiva binaural de chirrido superrápido de 90 Hz. Las mediciones del umbral auditivo con el protocolo binaural chirp 90 Hz son suficientes para la mayoría de las cuestiones clínicas, en particular para los exámenes auditivos en la práctica veterinaria. En este estudio, no comparamos el protocolo binaural de clic de 90 Hz y el protocolo binaural de chirp de 90 Hz, porque solo pretendíamos demostrar que el protocolo binaural de chirp de 90 Hz es tan bueno como el protocolo de clic de 30 Hz, pero mucho más rápido para las mediciones del umbral de audición. Cabe señalar que el estímulo de chirrido utilizado se desarrolló originalmente con un modelo de cóclea diseñado para humanos. Los estudios futuros que utilicen un modelo coclear específico para perros y para razas caninas pueden conducir a umbrales de audición aún más bajos y a una mejor detección automática de picos V, liberando todo el potencial del estímulo del chirrido. Entonces, sería interesante una comparación del clic estándar y múltiples chirridos con una tasa de estímulo de 90 Hz.

4.4 Detección automática de picos V

La introducción de un algoritmo para la detección automática del pico V en el ABR canino redujo aún más el tiempo de prueba. Se necesitaron menos estímulos para registrar una respuesta a altas intensidades de estimulación en perros con audición normal. El tiempo de prueba para ambos oídos se acercó a 1 min cuando se utilizó adicionalmente esta modalidad (Figura 3). La revisión de las formas de onda ABR confirmó que el algoritmo detectó correctamente el pico V. El modo automático promedió progresivamente más estímulos para cada intensidad, llegando hasta los 1.000 estímulos, cuando la amplitud del pico V era menor y más cercana al umbral auditivo. Luego, el examinador juzgó si todavía había un pico V o no. Si bien el algoritmo para la detección automática del pico V se ajustó a lo largo del estudio, una limitación es que el ajuste automático del marcador para el pico V no es consistentemente preciso en el punto más alto del pico y es posible que aún sea necesario realizar algunos ajustes para una ubicación precisa. En medicina humana, muchos autores enfatizan la importancia de los métodos automáticos para la evaluación de la calidad o la detección automática de picos para reducir el tiempo de prueba, obtener evaluaciones objetivas de los resultados, reducir los errores o sesgos humanos y mejorar la uniformidad de la prueba (23, 48). La necesidad de un cribado auditivo objetivo y rápido en los recién nacidos ha estado presente durante un período considerable (48). En la actualidad, existen numerosos estudios en medicina humana que describen las mediciones del umbral de ABR con una detección automática de picos u ondas (48-51). Hasta donde saben los autores, no había datos sobre la detección automática de picos en animales de compañía. Sin embargo, en medicina veterinaria, la optimización de la detección automática de ondas y picos podría introducir aún más objetividad en las pruebas.

4.5 Tiempo de prueba

En 2011, Wilson et al. (7) ya informaron sobre el ahorro de tiempo en el diagnóstico integral y la evaluación del umbral auditivo al aumentar las tasas de estímulo hasta 91 Hz. En resumen, el uso de todas las modificaciones (modo de prueba binaural, aumento de la tasa de estímulo, estímulo de chirrido y detección automática de pico V) acortó significativamente el tiempo de prueba para la medición del umbral auditivo. Cada modificación adicional contribuyó a una reducción significativa del tiempo de prueba. En general, el tiempo de prueba para la evaluación del umbral auditivo en ambos oídos podría reducirse de 25,7 min con el protocolo monoaural de clic de 11 Hz a 1,11 min con el chirrido binaural de 90 Hz, incluido el protocolo automático de detección de pico V. Este hecho sugiere que las pruebas auditivas ABR súper rápidas podrían ser una opción atractiva para que los veterinarios ofrezcan a sus clientes.

4.6 Datos clínicos

Los resultados mostraron que las alteraciones clínicas, como la otitis externa, o una edad más avanzada se asociaron con una disminución de la capacidad auditiva de los perros. Los oídos afectados por otitis externa y los perros > 10 años de edad tenían umbrales de audición medios de 65 dBnHL y 58 dBnHL, respectivamente. Por el contrario, los perros <10 años de edad y oídos sin anomalías tenían umbrales de audición medios de 26 dBnHL y 15 dBnHL, respectivamente. Los umbrales de audición medidos también se correlacionaron con los resultados del cuestionario de pérdida auditiva (18). El umbral medio de audición de los perros con una puntuación auditiva elevada (68 dBnHL) fue significativamente mayor que el de los perros con puntuaciones auditivas y de otitis poco notables (15 dBnHL). Los 15 oídos sordos fueron identificados por el cuestionario. Hay algunos otros estudios que investigaron la pérdida de audición en poblaciones de perros y demostraron asociaciones similares. En 2013, Mason et al. (18) ya señalaron que la puntuación auditiva, proporcionada por el dueño del perro, era útil para detectar la pérdida auditiva de grado 2 o superior en los perros. En su estudio, una pérdida auditiva de grado 2 indicaba una pérdida auditiva bilateral con un umbral ≥41 dBnHL. Entre los perros con otitis externa o media, solo el 22% tenía audición normal (≤25 dBnHL), el 25% tenía pérdida auditiva unilateral y el 53% tenía pérdida auditiva bilateral (18). En 2010, Harcourt-Brown et al. (17) compararon el umbral de audición de Cavalier King Charles Spaniels con y sin derrame del oído medio. Las pruebas ABR revelaron pérdida auditiva conductiva en perros con derrame del oído medio. La mediana del umbral auditivo para los perros con derrame del oído medio fue de 60 dBnHL, en comparación con 30 dBnHL para los perros sin derrame del oído medio. En general, estos estudios mostraron una relación significativa entre la presencia de otitis y un umbral auditivo más alto (17, 18).

En 2008, Ter Haar et al. (15) investigaron los efectos del envejecimiento en las respuestas evocadas auditivamente del tronco encefálico de frecuencia específica. Los umbrales de los perros mayores (de 11 a 14 años) fueron significativamente más altos en todas las frecuencias probadas que los umbrales de los dos grupos de perros más jóvenes. Sus resultados indicaron que la pérdida auditiva relacionada con la edad comienza a la edad de 8 a 10 años en los perros. Más recientemente, en 2022, Fefer et al. (14) investigaron la «Relación entre la audición, la función cognitiva y la calidad de vida en perros de compañía de edad avanzada» y observaron que los perros con un umbral de audición de 70 o 90 dB eran significativamente mayores que aquellos con un umbral de audición de 50 dB. Estos estudios también son consistentes con nuestros hallazgos y demuestran el potencial de la detección auditiva para el diagnóstico rutinario de trastornos auditivos en perros.

Los 3 perros en estado de coma, a los que se les diagnosticó muerte cerebral, no mostraron ningún pico en sus BRA. Anteriormente, ninguno de estos perros era considerado sordo por el propietario. En 1994, Steiss et al. (20) informaron sobre 4 perros que mostraban signos de muerte cerebral. Dos perros no mostraron ningún pico en su ABR. No informaron ningún detalle sobre los ABR de los otros 2 perros. En los seres humanos, un ABR plano es el patrón más común en la muerte encefálica. Sin embargo, el pico I aún podría estar presente en algunos pacientes inmediatamente después de la muerte encefálica. El pico I, que surge del nervio auditivo cerca del ganglio espiral, desaparece gradualmente después de la muerte encefálica en línea con el aumento de la hipoxia y la hipotermia de la cóclea (52).

En resumen, la integración de las modificaciones de ABR derivadas del cribado auditivo neonatal de nueva generación logró una reducción significativa del tiempo de prueba. Por lo tanto, las mediciones del umbral auditivo pueden formar parte de la rutina diagnóstica en la práctica veterinaria.

Declaración de disponibilidad de datos

Los datos brutos que respaldan las conclusiones de este artículo serán puestos a disposición por los autores, sin reservas indebidas.

Declaración ética

Los estudios en animales fueron aprobados por el Comité de Ética de la Facultad de Veterinaria de la LMU Múnich (AZ 333-20-09-2022). Los estudios se llevaron a cabo de acuerdo con la legislación local y los requisitos institucionales. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de los propietarios para la participación de sus animales en este estudio.

Contribuciones de los autores

AS: Conceptualización, Curación de datos, Análisis formal, Investigación, Metodología, Validación, Visualización, Redacción – borrador original. GB: Curación de datos, Investigación, Validación, Redacción, revisión y edición, Análisis formal. SD: Investigación, Metodología, Supervisión, Redacción – revisión y edición, Conceptualización. YZ: Análisis formal, Validación, Visualización, Escritura – revisión y edición. AF: Conceptualización, Investigación, Metodología, Administración de Proyectos, Supervisión, Validación, Visualización, Redacción – Revisión y Edición.

Financiación

El/los autor/es declaran/n que no se recibió apoyo financiero para la investigación, autoría y/o publicación de este artículo.

Conflicto de intereses

Los autores declaran que la investigación se llevó a cabo en ausencia de relaciones comerciales o financieras que pudieran interpretarse como un posible conflicto de intereses.

El/los autor/es declararon, en el momento de la presentación, ser miembro del consejo editorial de Frontiers. Esto no tuvo ningún impacto en el proceso de revisión por pares ni en la decisión final.

Nota del editor

Todas las afirmaciones expresadas en este artículo son únicamente las de los autores y no representan necesariamente las de sus organizaciones afiliadas, ni las del editor, los editores y los revisores. Cualquier producto que pueda ser evaluado en este artículo, o afirmación que pueda ser hecha por su fabricante, no está garantizado ni respaldado por el editor.

Material complementario

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Referencias