Resumen

El virus de la virola de la cabra (GTPV) es un importante capripoxvirus que causa enfermedades graves en cabras, aunque las funciones de muchas proteínas codificadas en GTPV siguen sin estar claras. En este estudio, el factor de iniciación de traducción eucariota 4A1 (eIF4A1) fue identificado como una proteína huésped que interactúa con GTPV Hrf-063 mediante un pull-down GST combinado con análisis LC-MS/MS. Esta interacción se confirmó además mediante ensayos recíprocos de pull-down y co-inmunoprecipitación en células de mamíferos. El análisis de mapeo de dominios mostró que la región N-terminal de Hrf-063 y los aminoácidos 211–330 de eIF4A1 eran críticos para su interacción, y la microscopía confocal demostró que ambas proteínas se localizaban predominantemente en el citoplasma. Los análisis funcionales mostraron que Hrf-063 se asoció negativamente con la expresión de eIF4A1 durante la infección por GTPV, mientras que la modulación de eIF4A1 afectó la expresión de la proteína asociada a la virulencia de GTPV, Klp2. Además, la perturbación de Hrf-063 o eIF4A1 alteró la expresión de STAT1 y CAV1, y Hrf-063 reguló la transcripción de ISG15 y STING1 de manera dependiente del tiempo y de la infección. Los ensayos TCID₅₀ mostraron además que la expresión alterada de Hrf-063 o eIF4A1 afectaba la producción infecciosa de GTPV. En conjunto, estos hallazgos identifican a eIF4A1 como socio de interacción del huésped de GTPV Hrf-063 y sugieren que el eje Hrf-063–eIF4A1 está implicado en la expresión de proteínas virales, la regulación inmune innata y la producción de virus infecciosos.